宁夏三个葡萄丁曼二, r 制, 铜口口口种高效再生体系的建立.pdfVIP

· 生物技术 · 北方 园艺2011(22)：118～121 丁宁夏曼 三二个，r制葡 萄铜， 口口口种 高效再 生体 系 的建立 王 敬 东 ，张 丽 ，马 洪 爱 ，陈 晓 军 ，关 雅 静 ，宋 玉 霞 (1．宁夏农业生物技术重点实验室，宁夏 银川 750002；2．北京林业大学 林木育种国家工程实验室，北京 100083) 摘 要：以宁夏葡萄产业中大量种植的3个葡萄品种为试材建立再生体系。采用花药、茎尖 进行愈伤组织诱导，比较了3种葡萄用花药、茎尖培养诱导愈伤组织形成、分化、生根的必须培养 条件，获得不定芽分化再生植株。结果表 明：葡萄花药愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很低， 几乎不能分化成苗；而茎尖愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很 高，分化成苗率极高，达 10096／。 B5培养基诱导宁夏葡萄茎尖愈伤组织和分化丛生效果最好；KT有利于愈伤组织分化；茎尖浓度 以0．8～1．0cm 最好 。 关键词：葡萄；花药；茎尖；胚状体；再生体系 中图分类号：S663．1 文献标识码：A 文章编号：1001一O0O9(20l1)22一O118一O4 葡萄组织培养不仅能加快优 良品种 的繁殖和推广 1 材料与方法 速度 ，而且为发展脱毒植株开辟了新的途径。关于葡 1．1 试验材料 萄植物组织培养方面已有大量的文献报道_1]，曾建国 供试材料为宁夏主栽葡萄品种 “霞多丽”(干 自)、 等__3]以“巨峰”葡萄的带芽茎段为外植体，进行快繁育 “赤霞珠”(干红)、“红地球”(鲜食)，2009年 5月 31日 苗。吴伟 民等 ]以 宿‘晓’红葡萄单芽茎段为外植体进 采 自宁夏农林科学院芦花台园林场 ，放 4℃冰箱保存、 行离体培养。张爱华等 利用茎尖培养获得新疆 “紫 备用。 香无核”葡萄脱毒苗。 1．2 试验方法 目前 ，茎尖组织培养是植物组织培养的常规技术 ， 1．2．1 葡萄花药愈伤组织的诱导 取葡萄小孢子 四 已被广泛应用 ]。9O 的葡萄植株再生都是通过愈伤 分体期到单核期 的花药进行接种。取 回的花蕾放入 组织间接再生的 ]。廖文雪等[8]以刺葡萄叶片为材料 4℃冰箱预处理 5～8d。花蕾用 75 的酒精浸泡 10S， 诱导出愈伤组织 ，但愈伤组织未能分化出芽，只分化出 0．1 升汞消毒 8min，无菌水冲洗 3～5遍后 ，取不 同 了不定根。陈莉等__6]以玉米茎尖分生组织为材料进行 部位的小花，剥离花药 ，接种于不同植物生长调节剂组 了诱导胚性愈伤组织的研究。 合的诱导培养基中。培养温度 (26t-1)℃，暗培养 ，待 我国从 1979年开始葡萄组织培养研究 ，为葡萄脱 愈伤组织长 出后，转 到 2000lx下进行光培养，光 毒植株的培养奠定了基础。该研究是在前人工作 的基 照14h／d。 础上，以宁夏葡萄产业中大量种植 的3个葡萄品种为 1．2．2 葡萄茎尖愈伤组织 的诱导 将葡萄茎尖用 材料，对组织培养外植体选择、培养基及植物生长调节 75 酒精浸泡 15S，0．1 升汞消毒 12min，无菌水冲 剂等关键技术进行更深入研究，建立茎尖愈伤组织培 洗