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体外循环对大鼠血脑屏障及紧密连接蛋白表达的影响 沈阳军区总医院麻醉科 110840 曹惠鹃, 周锦,孙莹杰,张铁铮,姚婧 曹惠鹃,博士研究生,,caohuijuan12@ 周锦,博士,硕士生导师,,zhoujin6@126.com 论文类别:中青年论坛,麻醉临床与基础研究 摘 要 背景与目的 脑损伤是体外循环CPB的一个重要并发症,CPB可增加血脑屏障BBB的通透性,但其机制尚不完全清楚。本研究通过建立大鼠CPB模型,观察CPB对大鼠BBB功能及脑血管内皮紧密连接蛋白表达的影响, 探讨CPB引起大鼠BBB功能损伤的机制,为临床新的脑保护策略提供依据。 方法 健康雄性清洁级Sprague-Dawley大鼠32只,4~6个月龄,体重320~370g,按随机数字表分为假手术组S组和体外循环组C组,每组16只,S组进行相应的麻醉和手术操作但不进行CPB,C组进行CPB60min并继续观察2h。每组又随机分2个亚组:一亚组测大鼠海马区脑组织伊文思蓝(EB)含量;另一亚组应用干湿比重法测大鼠海马区脑组织含水量,Western-blot方法检测紧密辨别辨别连接蛋白Occludin和ZO-1的表达,在透射电镜下观察大鼠海马区BBB超微结构的变化。 结果 两组大鼠麻醉后平均动脉压、心率、血气、红细胞比积差异无统计学意义P?0.05。与S组比较,C组大鼠海马区脑组织EB含量和含水量升高,差异均有统计学意义P 0.05。与S组比较,C组大鼠 脑血管内皮紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达水平下降,差异均有统计学意义P 0.05。S组BBB基膜均匀一致,完整性良好,内皮细胞间的紧密连接完整。C组基底膜变厚,内皮细胞不均匀,毛细血管内皮细胞向管腔伸处许多突起,微血管腔狭窄,红细胞受阻,内皮细胞间紧密连接不清楚。 讨论 BBB是是维持中枢神经系统和外周之间离子梯度的最关键的屏障系统,其结构与功能的正常主要靠毛细血管内皮细胞间TJ结构的完整来维持。脑组织中EB含量的多少反映了BBB的损伤程度。本研究结果显示,CPB组EB含量明显高于假手术组,说明CPB期间有BBB的损伤;C组海马区脑组织含水量较S组明显升高,提示CPB期间有脑水肿的存在。可见,CPB可使BBB结构受损,导致屏障作用减弱,通透性增加,使生理状态下不能通透的物质穿越BBB进入组织间隙,继发血管源性脑水肿。本研究发现,CPB使紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达水平显著下降,提示CPB导致BBB紧密连接的结构和功能受损。透射电镜结果也表明,BBB紧密连接的中断使脑血管内皮细胞不均匀,基底膜变厚,毛细血管内皮细胞向管腔伸处许多突起,微血管腔狭窄,红细胞运行受阻。 结论 CPB使大鼠BBB的结构发生变化、通透性增加,其机制可能与大鼠脑血管内皮紧密连接蛋白改变有关。关键词: 体外循环;紧密连接蛋白;血脑屏障 Effects of cardiopulmonary bypass on blood-brain barrier and the expression of tight junction associated protein in a rat model Cao Hui-juan, Zhou Jin,Sun Ying-jie, Zhang Tie-zheng, Yao Jing Department of Anesthesiology of the General Hospital of ShenYang Military Region, Liaoning Shenyang 110840,China Abstract Background and objective Brain injury after cardiac surgery is considered to be a serious consequence of cardiopulmonary bypass CPB. CPB can increase the permeability of blood-brain barrier BBB, but its mechanism is not clearly explained.The aim of this study was to investigate the effects of CPB on BBB and the expression of tight junction TJ associated protein of cerebral vascular endothelium in a rat model, explore the mechanism of BBB injury induced by CPBMethodsAdult male Spragu