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? 卞圃 膏科技
高精料日粮下硫胺素对体外培养荷斯坦牛瘤胃微
生物消化代谢的影响
郝志敏,王洪荣,潘晓花,蔡晶晶,季昀,朱靓婧,王景
扬州大学动物科学与技术学院,扬州
中图分类号: 文献标识码: 文章编号:? ? ?摘要:本试验旨在揭示高精料日粮条件下硫胺素对体外培养荷斯坦牛瘤胃微生物消化代谢的影响。以 头安
装永久性瘤胃瘘管的荷斯坦牛为试验动物,设置精粗比为 : 的底物。硫胺素的添加量设为 、 、 、
和 / 个水平,采用人工瘤胃体外发酵方法研究硫胺素对瘤胃微生物发酵的影响。试验结果表明, 高精料日粮条件下添加硫胺素可以提高培养液的 值; 高精料日粮条件下 浓度随着硫胺素
添加水平的提高而降低; 高精料日粮条件下硫胺素提高了细菌蛋白的产量而降低了原虫蛋白的产量。
关键词:荷斯坦牛;硫胺素;体外培养
硫胺素属水溶性维生素,它以硫胺素焦磷酸辅 养奶牛瘤胃微生物消化代谢的影响,以寻求一个适
酶 的形式参与碳水化合物代谢过程中【一酮 宜的硫胺素添加量,为奶牛集约化饲养提供参考。
酸的氧化脱羧反应。是动物体内整个能量代谢过程 材料与方法
和支链氨基酸代谢所必需的水溶性维生素:同时对 . 试验动物
神经和大脑功能也有重要作用嘲。长期以来,人们一 本试验选择 头身体健康状况良好,安装永久
直认为反刍动物瘤胃的微生物能合成充足的硫胺 性瘤胃瘘管的荷斯坦牛,用于瘤胃液的采集。
. 试验设计
素,并能满足其营养需要 。然而,近年来随着反刍
动物生产性能和养殖集约化程度的不断提高,在生 本试验选用单因子 水平试验设计, 为对照
产中发现。反刍动物在特定的饲养条件或生理状况 组,不添加硫胺素,其他 组 ? 添加不同剂量的
下也需要在日粮中添加硫胺素等水溶性维生素,一 硫胺素,每组设 个重复。用半纯合日粮作为底物
些研究者也发现在高产奶牛的高精料日粮中添加 进行培养,日粮精粗比为 : ,连续培养,在 、
硫胺素有助于提高产奶量和乳中蛋白质含量 。反、 、 、 、、、采取培养液样品。
. 体外培养
刍动物体内一旦缺乏硫胺素,则碳水化合物代谢过. 体外培养底物与人工唾液盐的配制
程受阻,中间代谢产物乳酸就会积累,从而成为诱
发瘤胃酸中毒的重要原因 。因此,关于硫胺素等 表 人工瘤胃发酵底物组成%与硫胺素的添加量《 /族维生素的研究再次引起人们的极大关注。本试验
在高精料日粮条件下即精粗比为 : 时,通过在底物
中添加不同浓度的硫胺素,来研究硫胺素对体外培
收稿日期:? 一
作者简介:郝志敏 一 ,男,山西汾阳人,硕士研究生,专业为动
物营养与饲料科学。
通讯作者:王洪荣.教授,博士生导师。卞圈 斗科技?
表 人工唾液盐组成
为原虫.用生理盐水洗涤两次后用生理盐水悬浮,
成分 含量 /
一℃贮存待测。 .
.
. . . 细菌:收集 . . . 离心后的上清,再高速 .
离心 , ,收集沉淀为细菌,其余处理同.
. . 。
. . 体外培养操作 . . 微生物真蛋白含量的测定 采用三氯乙酸瘤胃液的采集 在奶牛早饲前,利用自制真 沉淀蛋白法,瘤胃液经 高速离心
空负压装置,分别采集两头瘘管牛瘤胃液各 , ,弃上清液加入 %三氯乙酸,混匀,
经两层纱布过滤,装入保温瓶,通,置于 ℃水 置室温 后,经 离心,弃上清液,
浴中保温。 加入% 混匀溶解后,经离心标注 按照试验设计称取不同的底物,于不 ,取上清液进行样品分析,用型紫外分光
同标号的三角瓶中紫外灭菌 ,分别加入人工唾 光度计测定波长分别为 和 的 值。
液 事先通至饱和,于 ℃水浴 ,
计算公式:/ ..一 .再分别加人混合瘤胃液 ,塞好橡皮塞,通过进 ×稀释倍数
气通道通人混合气体至饱和, ℃恒温水浴。增设一 . 数据处理
个空白对照,即瘤胃液与人工唾液的混合液。 用 软件整理数据.采用 . 软件中
动态发酵参数样品采集 分别在培养开始后 的单因子方差分析法进行统计分析,并用法进行、 、 、 、 、、、取样,每次取, 多重比较。显著性差异水平设为. ,极显著差
分装于 只的离心管中,立即测定 值,一异水平设为. 。试验结果以“平均值±标准误”
冷冻保存,用于 一 浓度的测定。培养结束后,培 表示。
养液以 分装,一 ℃冷冻保存,用于分离微生物 结果与分析
以测定其他指标。 . 体外培养条件下硫胺素对培养液 值的影响
表 体外培养条件下硫胺素对 值的影响
. 指标测定及方法
时间
. .值测定 一 型 计测定瘤胃液的 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 值。 . .. .. .. .. . . . 瘤胃液中 一 浓度的测定㈣ 用苯酚一次氯 . .. ..
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