黑龙江省野生黑木耳菌株遗传多样性分析.pdfVIP

中圊基学通报 , : ? 黑龙江省野生黑木耳菌株遗传多样性分析 陶朋飞,许修宏,刘华晶 东北农业大学资源与环境学院,哈尔滨 摘 要:利用 标记对黑龙江地区采集的 株野生黑木耳菌株进行遗传多样性分析,利用 对扩增 条带清晰、多态性丰富、稳定性较好的引物对 个供试菌株进行扩增,共得到 条重复性良好 的条带,其中多态性条带 条,占 . %;使用 法构建进化树, 个菌株被分为 组。 结果表明,黑龙江省野生黑木耳菌株间存在着丰富的遗传多样性。本研究为将来杂交育种亲本的选择 提供很好的理论依据。 关键词:野生黑木耳; 标记;遗传多样性;聚类分析 中图分类号: 文献标志码: 论文编号: ,,,, : . . % .. ...?.: ; ; ; 术对 个毛木耳品种进行分析,并分成 个类群,唐丽 引言 黑木耳学名 亦称木耳、光木 华 等利用和 技术对国内的 个栽培品种 耳、云耳等,隶属于担子菌亚门 ,异 进行遗传多样性分析,聚类分析结果表明利用 种方 法菌株可以分别聚类为 个和 个类群,栽培菌株问遗 担 子 菌 纲 ,木 耳 目,木耳科 ,木耳属 传多样性比较丰富。 标记所包含信息量比 】。黑木耳经历了长时间的人工驯化和 多。而对野生菌株的种质资源研究尚处于空白阶段, 野生资源多样性是否丰富决定能否选育出优质黑木耳 自然选择,遗传背景非常复杂,掌握黑木耳之间的遗传 关系是育种工作的关键。目前国内外对黑木耳种质资 菌株。开展黑木耳野生种质遗传多样性研究,对于黑 木耳种质资源的收集、保存、评价和利用具有重要意 源研究主要集中于栽培品种及毛木耳,如张介驰等口 利用技术对东北地区主栽的 个黑木耳菌株进 义。本试验将 标记应用到黑龙江地区野生黑木 耳菌株的遗传多样性研究中,以期为黑木耳优良菌种 行聚类分析,相似水平在 . 时,可将 个供试黑木 耳菌株分为 个类群,许晓燕 利用 和 技 选育及建立种质资源信息库提供依据。 基金项目:国家“十一五”科技支撑项目 :东北农业大学创新团队发展计划基金资助? ? 。 第一作者简介:陶朋飞,男,年出生,安徽六安人,硕士研究生,从事农业微生物方面的研究。通信地址:黑龙江省东北农业大学南 室, : ? , ? :.。 通讯作者:许修宏,男,年出生,黑龙江哈尔滨人,教授,博士生导师,博士,从事微生物学方面的研究。通信地址: 黑龙江省东北农业大学 应用与微生物系, : , ? : . 。 收稿日期:. . ,修回日期: ? 。 中国农学通报: .. . 丝,一 ℃备用。 酰胺凝胶电泳,电泳 . ,银染检测。所有 . 基因组的提取 样品至少做 次重复。 总的提取采用 法 。提取的质 . 照相及数据分析 量和浓度经%琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检 胶晾干后,用数码相机拍照。根据电泳结果直接 记录带型,扩增出强带或可分辨/重复性好的弱带均视 测,样品稀释到 / 后,置. ℃冰箱保存。扩增 为扩增阳性赋值“”,其余为扩增阴性赋值“ ”,用 根据优化实验的结果, 反应体系为: ×. 软件进行聚类分析,构建野,模板,./ , 生黑木耳菌株问的树状图谱。 结果与分析. / ,上下游引物各 / ,聚合酶,. ,用双蒸水调整 . 引物筛选 体系使终体积为 。反应程序如下:预变性 选用 个上游引物 个下游引物表 ;反应前 个循环为变性 , ℃复性,组合成 对引物,对部,延伸 ;随后的 个循环退火温度提高 分菌株进行 分析,结果有 对引物组合能扩增 出比较理想的图谱,引物组合分别是:, 到 ℃,最后 ℃延伸。采用 %的变性聚丙烯 表 标记的正向引物、反向引物 的序列 引物 序列 引物 序列 , , , , , 条,占条带总数的 . %;平均每对引物组合扩增 , 。 出 条条带, 条为多态性条带,不同引物组合扩增 . 相似性分析 出的条带数的差异较大,条带数最多的是引物组合 ,共扩增出 条条带;条带数最少的引物组. 扩增结果 被筛选出的 对引物组合扩增出 的总条带数、多态性条带数及多态性比率见表 。 对 合是 ,仅有 条条带。图 为引物组合 引物组合共扩增出 条条带,多态性条带共 对 株野生黑木耳菌株种质资源的 图 引物 扩增的结果陶朋飞等:黑龙江省野生黑木耳菌株遗传多样性分析 个菌株被分为 个类群,第 类群包括 个菌株: 扩增结果。 . . 遗传相似性分析 综合 对引物条多态性条. 、 、、 、 、 、 、、、、 、 和;第 、 、 类群 带,用 对 株野生黑木耳菌株进行聚类分析, 得出菌株问的聚类图 图 。结果表明:各菌株问的 均包括 个菌株,分别为和 ;和;;第 类群包括: 、、、 、 相似系数在 . ~