用清除超氧阴离子自由基法评估竹叶提取物抗氧化能力.pdfVIP

维普资讯 第 28卷 ，第8期 光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vo1．28，No．8，pp1823—1826 2008年 8月 SpectroscopyandSpectralAnalysis August，2008 用清除超氧阴离子 自由基法评价竹叶提取物抗氧化能力 郭雪峰，岳永德 ，汤 锋，王 进，姚 曦 国际竹藤网络中心，国家林业局竹藤科学与技术重点开放实验室，北京 100102 摘 要 通过对邻苯三酚反应体系的吸收光谱，对 自氧化速率及邻苯三酚浓度和缓冲液pH值对反应体系 产生的超氧阴离子 自由基清除率的影响进行了研究。分光光度法测定邻苯三酚反应体系的检测波长为319．5 nlTl，反应体系体积 10mL，反应时间为9min，3mmol·L1邻苯三酚加入量为 0．3mL，Tris-HC1缓冲液 pH值为8．2，自氧化速率为0．035；用上述方法研究合成抗氧化剂叔丁基对苯二酚 (TBHQ)和竹叶提取物样 品浓度和清除率的关系，以 C5o值(清除率为50 时的浓度值)作为评价指标，测得 TBHQ和效果最好样品 的IC50值分别为TBHQ(95．01mg·L )和M40(298．69mg·L )，M40等竹叶提取物可以作为天然抗氧 化剂进行开发。 关键词 竹叶提取物；超氧阴离子 自由基 ；清除率；IC5。值 中图分类号：TS201．2 文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2008)08—1823—04 1．2 竹叶材料及前处理方法 引 言 毛竹(Phyllostachysedulis)叶于 2006年 9月采 自江苏 省南京林业大学竹种园。 竹叶为 “药食两用的天然植物”，其竹叶提取物可以作为 取 6000g毛竹叶粉，95 乙醇，料液比1：10，温度60 一 种生物黄酮类保健营养素进行开发。迄今为止，国内外用 ℃，热回流提取4次，提取液过滤浓缩得浸膏；浸膏用尽量 于评价植物抗氧化能力的方法有硫氰酸盐法[1]、硫代巴比妥 少 95 乙醇溶解后上AB-8大孔树脂柱，分别用纯水，20％， 酸法[2]、抗氧化能力指数法[3]、化学发光法[4]、清除自由基 40 ，60 ，80 乙醇、丙酮洗脱；水洗脱组分弃用，其他洗 法[5蜘等，这些方法各有利弊。邻苯三酚 自氧化的机理极为 脱组分浓缩得干膏，备用。各洗脱组分简称如下：浸膏上大 复杂，至今研究的还不是十分清楚。近年来，国内外也有一 孔树脂柱，水洗脱后 ，20％乙醇洗脱下组分 (M20)；20 乙 些利用邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子自由基法评价抗氧化 醇洗脱后，40 乙醇洗脱下组分 (M40)；40 乙醇洗脱后 ， 能力的报道 ]，但方法体系需进一步系统的研究。本文对 60 乙醇洗脱下组分 (M60)；6O％乙醇洗脱后，80％乙醇洗 影响邻苯三酚自氧化法的诸多因子进行了系统的研究，建立 脱下组分(M80)；80 乙醇洗脱后 ，丙酮洗脱下组分 (MA)。 了一种完善的评价清除超氧阴离子 自由基能力的方法，并用 1．3 溶液配制 其评价了竹叶提取物的抗氧化能力。 1．3．1 样品试液配制 分别称取合成抗氧化剂(TBHQ)和样品，并用95％乙醇 1 材料和方法 定容到 100mL，得各样品试液质量浓度分别为 ：TBHQ： 2．669mg ·mL～ ，M 2