血管新生抑制剂Kringle5结构及改造研究进展.pdfVIP

中国药物与I临床2010年 1．2月第 lO卷第 12期ChineseR—emediesClinics,Dece—mber2010,Vo1．10,No．12 血管新生抑StJ~tJKringle5结构及改造研究进展 陈显久 牛 勃 赵荣瑞 Kringle5是血浆纤维蛋 白溶酶原(plasminogen， 内皮细胞生长。而Pgn却无此作用。在小鼠模型中， Pgn)的第5个饼环 区结构 (kringledomain)，在体外 用人Pgn酶解后纯化的血管抑素也能抑制肿瘤转移 具有抑制内皮细胞增殖，抑制 内皮细胞迁移的生物 灶生长。进一步的试验还表明血管抑素的抑制作用 学活性，在体内可抑制多种血管新生模型的新生血 对 内皮细胞具有特异性。如果用Pgn相应区域的抗 管形成(angiogenesis)，甚至可抑制肿瘤的生长和转 体．可以耗竭人和小鼠尿液中的血管抑素，使抗内皮 移，在实体瘤、糖尿病视网膜病变、风湿性关节炎等 细胞和抗转移灶的作用消失。从而得出结论：血管抑 疾病的治疗中有广泛的应用前景[]。现将其近几年 素是肿瘤原发灶抑制转移灶生长的主要因子。这就 的研究情况综述如下。 为原发肿瘤抑制转移灶生长找到了直接的证据。同 1 Kringle5的发现 年．Cao等[s]报道了血管抑素的抗血管内皮细胞增殖 Kringle5是在血管抑素的基础上发现的，肿瘤 活性。1997年。该研究小组使用弹性蛋 白酶和 胃蛋白 外科医师在临床工作 中观察到：切除肿瘤原发灶 酶消化Pgn获得Kringle5，使用牛血管内皮细胞证实 后，可迅速 出现转移灶或远处原有的转移灶快速增 了Kringle5也具有抑制血管内皮细胞增殖活性，其 长。为了研究原发肿瘤对转移灶抑制的机制，先后 半数有效量(ED50)为50nmol／L，重组的鼠源Kringle5 进行了2项研究：①0Reilly等[]建立了一种转移癌 蛋白与酶解获取的Kringle5片段活性相似[6]。 模拟动物模型，然后将Lewis肺癌细胞种植于同源 2 Kringle5结构及其改造 的C57B16／J小鼠肺部，则原发灶可以抑制远处转移 2．1 Kringle5的分子结构：Kringle5是血Pgn中与血 灶，切除原发灶后，转移灶迅速增长；②在T细胞和 管抑素相连的另一个饼环区，由80个氨基酸残基组 B细胞缺陷的SCID小鼠模型中也得到同样的结果。 成．包含 3个二硫键[．相对分子质量约为 14000。 这说明肿瘤生长的抑制作用无须依赖完整的免疫系 在结构上与其他4个联环区相似．具有较高的同源 统。原发灶的存在可以抑制转移灶新生血管形成，但 性，其中与Kringlel同源性最高，为57．5％。Kringle5 不能阻止转移的肿瘤细胞到达肺部；切除原发灶后 与Kringlel结构上的相似性可能与它们都有较强的 的小 鼠用荷瘤小鼠的血清或浓缩尿液注射腹腔，也 抑制 内皮细胞增殖活性相关 [7]。与Kringle4相比， 可抑制转移灶生长。在体外实验中，荷瘤小鼠的血清 Kringle5缺乏2个带正电荷的赖氨酸对(在Kringle4 可以抑制碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblast 中分别与Cys22和Cys80相邻)，而这些正电荷基团 growthfactor．bFGF)诱导的牛毛细血管 内皮细胞 被认为是使Kringle4不具有抑制 内皮细胞增殖活性 (bovinecapillaryendothelialcell，BCE)增生，证 明在 的主要原因[。人Kringle5的结构不对称，有4个赖 循环血液 中有一种新生血管生长抑制因子。将该荷 氨酸结合位点 (1ysbindingsite，LBS)，被水分子 占 瘤小 鼠的血清和尿液提炼