重金属离子富集检测的微量热研究.pdfVIP

V0l_33 高等 学校 化 学 学报 No．12 2012年 12月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 2638～2643 重金属离子富集检测的微量热研究 王丽萍 ，胥 义 ，郑艺华 (1．上海理工大学生物系统热科学研究所，上海200093； 2．青岛大学机电工程学院，生物系统热科学研究所，青岛266071) 摘要 采用微量热技术对重金属离子的富集检测过程进行了研究．采用流动注射分析法研究了重金属离子 进样顺序、样品进样流速和载体树脂颗粒粒径对重金属离子抑制脲酶催化反应的影响，优化了脲酶及重金 属离子进样量，获得了脲酶固定化及重金属离子富集条件的优化参数．结果表明，在低流速 (0．1mL／min)， 载体树脂颗粒粒径为0．5～0．6mm，脲酶进样量为3mL，重金属离子进样量为5mL的条件下，先进行重金 属离子的富集，再检测其对固定化脲酶催化反应的影响可得到较好的检测效果．在实验浓度范围内，4种重 金属离子对脲酶催化反应的影响顺序为砷离子铜离子镉离子铅离子．本文对重金属离子进行 了适当的 富集，降低其检测下限，为采用微量热法进行重金属离子的快速检测提供了理论依据． 关键词 微量热法；富集 ；酶抑制法；重金属离子 ；抑制率 中图分类号 0652；0642．3 文献标识码 A doi：10．7503／cjc 重金属具有不可降解性，在人体内积聚可造成极大的危害，因此重金属的检测非常重要．传统的 重金属检测方法有原子吸收法 J、溶出伏安法 和电感耦合等离子体光谱法 等，这些方法的灵敏度 高、特异性强，但均存在样品前处理较复杂、仪器费用高且难 以用于现场快速检测等缺陷，无法满足 待测样品数量急剧增多的需求．近年来，具有快速、简便且样品用量少等优点的酶抑制法受到更广泛 的关注 ． 目前，关于酶抑制法的研究主要集中在光学和电化学方面 ，但这2类方法存在电活性物质、 离子、样品颜色和浊度产生的干扰作用．而利用生化反应中普遍存在热效应的微量热法能克服这些缺 点，该方法通过高灵敏度的微量热仪直接测量酶催化反应过程中微小的热量变化，具有灵敏度高、操 作简单等优点，被认为是一种具有潜在应用价值的检测方法 Uj“J．如果对待测试样进行适当的富集， 能大大提高有效热信号的强度 ，J，改善其特异性．但是，迄今针对重金属离子富集、检测过程中的 酶促放热反应及优化条件等相关问题的研究鲜见报道． 本文将微量热技术与流动注射分析技术联用，对重金属离子富集检测过程所伴随的微小热量变化 进行了研究．对脲酶固定化及重金属离子富集条件进行了优化，并在优化条件下进行不同种类和浓度 的重金属离子对脲酶催化反应过程热信号影响的初步探索．此方法集富集与检测于一体，提高了检测 的灵敏度和精度，以期为微量热技术用于重金属富集检测提供理论和实践意义． 1 实验部分 1．1 试剂与仪器 刀豆脲酶 (50U／rag，Sigma公司)；尿素 (O．3mol／L)；重金属铜、铅、镉及砷 的标准溶液 (1mg／mL)；柠檬酸缓冲液 (0．1molfL，pH=6．6)；其它试剂均为分析纯(国药试剂公司)． MicroDSCm微量热计 (法国Setaram公司)；THD-01515型低温恒温槽 (宁波天恒仪器厂)；电子 天平(梅特勒一托利多仪器上海有限公司)；18～35目不锈钢标准筛 (上海宜倡仪器纱筛厂)；SG-5462B 收稿 日期：2012-04．26． 基金项 目：国家自然科学基金(批准号50806036)、上海市教育委员会创新项 目(批准号：11YZ111)和上海市科学技术 委员会启明星项 目(批注号：08QA14052)资助． 联系人简介：胥 义，男，博士，副教授 ，主要从事生物系统热科学技术研究．E-mail：xu_hongyi@263．net 王丽萍等：重金属离子富集检测的微量热研究 2639 型四联磁力加热搅拌器 (上海硕光电子科技有限