二茂铁催化鲁米诺电致化学发光反应的研究.pdfVIP

( ) 第 32 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究报告 第 1 期 2004 年 1 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 29～32 二茂铁催化鲁米诺电致化学发光反应的研究 刘传之　钱柯君　杨敏丽　何品刚　方禹之 (华东师范大学化学系 , 上海 200062) 摘 　要 　在碱性 Tris 缓冲体系中 ,鲁米诺与过氧化氢的电致化学发光反应要在450mV 以上的电位下才可以发 ( ) 生 ,加入羧基二茂铁 FCA 可以使这一发光反应的起始电位负移 , 而且发光信号随电极电位的增大而急剧增 强。详细考察了这一催化发光体系 ,研究了影响发光强度的各种因素 ,建立了Luminol H O FCA 发光体系测 2 2 定 FCA 的电致化学发光新方法。方法测定二茂铁的检出限可达 1. 5 nmol/ L ,二茂铁浓度在 5. 0 ×10- 9 ～2. 0 × 10- 4 mol/ L 范围内与电致化学发光强度呈良好的线性响应关系。 关键词 　鲁米诺 , 羧基二茂铁 , 电致化学发光 1 　引　　言 化学发光(CL) 分析法是一种高灵敏度的分析方法 ,它已被广泛应用于各种物质的测定。电致化学 ( ) 发光 ECL 分析是通过电极反应而诱导化学发光的一种分析方法 ,它比一般的化学发光分析具有更高 的灵敏度和更好的选择性 ,而且可以实现原位分析 ,特别适合于那些因反应物不稳定而无法进行的化学 发光分析。近年来 ECL 在生物分析领域 ,尤其在免疫分析和核酸杂交分析1 ～4 方面的应用已日益引起 ( ) 人们的关注。鲁米诺 luminol 的化学发光分析已有很多报道。但它在电致化学发光分析方面的应用则 较少报道。有人曾报道用 Co2 + 5 ,Cu2 + 6 和Ni2 + 7 催化Luminol 的 ECL 反应 ,从而对这些物质进行了的 电致化学发光测定。本文研究发现,在 Tris 体系中并有 H O 存在时 ,Luminol 在一定的电位下可以产生 2 2 ( ) 电致化学发光反应,而羧基二茂铁 FCA 可以催化这一反应。它的加入不仅使这一发光反应的信号极 大地增强 ,而且使发光反应的起始电位负移 ,从而有效地消除因Luminol 本身在较高电位下产生发光而 造成的背景信号 ,使灵敏度和检出限得到改善。方法可用于 FCA 的测定 ,检出限为 1. 5 nmol/ L 。由于 FCA 可用来标记生物大分子 ,因此 ,本法可进一步应用于电致化学发光免疫分析和核酸杂交分析。 2 　实验部分 2 . 1 　仪器及试剂 自制电致化学发光分析仪( ) ( ) 如图 1 ,包括 990 型发光检测仪 上海容圣生物电子有限公司 ;Model ( )