5－脱氧杂氮胞苷修饰的肝癌细胞来源胞外体对淋巴细胞增殖功能的影响.pdfVIP

· 论 善 · JMedRes，Jun2011，Vo1．40No．6 5一脱氧杂氮胞苷修饰的肝癌细胞来源胞外 体对淋 巴细胞增殖功能的影响 张彩 虹 肖文华 耿 排 力 摘 要 目的 研究经 5一脱氧杂氮胞苷 (5一Aza—deoxycytidine，5一Aza—CdR)处理的肝癌细胞 HepG，分泌的胞外体 (ex— osomes)对免疫细胞增殖 能力 的影 响。方法 采用离心超滤等方法将经 5一Aza—CdR处理和未处理过 的肝癌细胞系 HepG，细 胞分泌 的 exosomes分离和纯化 。Ficoll淋 巴细胞分层液分离外周血单个核细胞 (PMBC)；将实验分为 exosomes实验组 (加药组)、 exosomes对照组 (未加药组)、加药 exosomes提取后上清组、未加药 exosomes提取后上清组、空 白对照组 。H 一TdR掺入法检测 PBMC细胞增殖状况 。结果 exosomes对照组及其上清液对淋巴细胞增殖功能有 明显的抑制作用 ，与空 白对照组 比较有显著性 差异 (P0．05)；而 exosomes及其上清液实验组对淋巴细胞增殖功能的影响明显减弱，与 exosomes和上清液对照组 比较存在显 著 的统计学差异 (P0．05)，而与空白对照组无统计学上 的差异 (P0．05)。结论 经 5一Aza—CdR修饰的 exosomes及其上清 液显著改善 HepG，来源的exosomes对淋 巴增殖功能的抑制作用 。 关键词 exosomes 5一脱氧杂氮胞苷 外周血单个核细胞 肝癌细胞 TheEffectsof5 一Aza —deoxycytidineM odified ExosomesDerived from Hepatoma Cellon theLymphoeytesProliferations． Zhang Caihong，XiaoWenhua，GengPaili．DepartmentofonCology，TheFirstAffiliatedHospital，P GeneraHospital，Beijing100048，China Abstract Objective Toinvestigatetheeffectsof5一Aza—deocycytidine(5一Aza—CdR1modifiedexosomesderivedfrom hepa— tomacellHepG2onthelymphocytesproliferations．M ethods Exosomesderivedfrom HepG2cellswith orwithouttreatmentby5一aza— CdR wereisolatedandpurifiedusingultrafihrationcentrifugationandsucrosegradientultracentrifugation．TheFicollreagentwasusedtoi— solateperipheralbloodmononuclearcells．Theexperimentsweredividedfivegroupsasfollows：5一Aza—CdR modified exosomesgroup and itssupernatantgroup；exosomescontrolgroupand itssupernatantgroup；andnegativecontrolgroup．H 一TdRwasusedtodetectlym— phocytesproliferations．W eaddeddifferentreagentsintothe96orificescontainingPBMC accordingtothegroups．Thecellswereincuba- tedfor24hoursand themultiplication ofPBMC wasdetectedbyH 一TdR．Results Theproliferation ofPBMCwassignificantlysup— pressedintheexosomescontrolgroupanditssupernatantgroupincomparisonwithnegativecontrolgroup(P0．05)．However，there