三种提取人腰椎间盘纤维环总RNA效率方法比较.pdfVIP

65() 内蒙 占医学杂志 InnerMongoliaMedJ2010年第 42卷第6期 ～ … 一 一 一 一 一 =一 一 ：一 一一 … 一 = 一 n 一 辅肌动蛋 白表达的实验研究[J]．中国修复重建外科杂志． 2008，22(4)：446—449． [收稿 日期]2009—9一l4 [13]ErdagG，Erog[uA，Morganj．elalCryopreservationoffetal [作者简介]徐洋 (1966一)，女，安 徽 省安庆 市 人。医学 skinisimprovedbyextraceBulartrehalose[J]Cryobiology，2002， 硕士。主任医师。 44(3)：218． 三种提取人腰椎间盘纤维环总RNA效率方法比较 王 剑 ，段 妍 ，贺永雄 (1．内蒙古 自治区医院骨科，内蒙古 呼和浩特 010017； 2．内蒙古医学院第二附属医院，内蒙古 呼和浩特 010031) [摘要]目的：通过比较利用不同方法抽提人腰椎间盘纤维环 RNA 的效果来评定抽提人腰椎间盘纤维 环总RNA的有效 的方法和步骤。方法：对 6O例腰椎间盘突出症患者在腰椎间盘摘除手术时切取摘除的椎 间盘组织，6O份标本分别用异硫氰酸胍法、Trizol法和膜结合柱分离法提取组织 中的RNA，用紫外可见分 光仪测定所得 RNA 的浓度和 OD260／OD280的比值并分别记录．另外记录提取 RNA所用的时间和 0D比 值大于 1．6O的阳性率以及平均每份标本所需的费用。结果 ：利用异硫氰酸胍法，平均耗时 160min，RNA平 均浓度为95．44 g／l，平均OD比值为 1．62，阳性率 58．3％；利用Trizol法提取总RNA，平均耗时 105min， RNA平均浓度为 531．40 g／l，平均 OD比值 1．40，阳性率 18．5％；利用膜结合柱分离法提取标本总RNA， 平均耗时41min，RNA平均浓度为690．34l上g／l，平均OD比值为 1。83，阳性率 100％。结论：膜结合柱分离 法是提取人腰椎间盘高质量总RNA 的有效方法。 [关键词]腰椎间盘突出症；椎问盘；提取 ；RNA [中图分类号]R681．533 [文献标识码]A [论文编号]1004—0951(2010)060650—04 ComparisonoftheEffectofVariousRNA ExtractionM ethodson HumanAnnulusFibrosusofIntervertebralDisc WANGJian，DUAN Yan，HEYong～xiong (1．DepartemtofOrthopedics，TheHospitalofInnerMongolia，Huhhot010017China； 2。 PSecondA liatedHospitalofInnerMongoliaMedicalCollege，Huhhot010031China) [Abstract]Objective：ToinvestigateaneffectivemethodandprocedurefortotalRNAextractionfromhu— manannulusfibrosusofintervertebraldisc．Methods：60piecesintervertebraldiscsfrom apicalareawereob— tainedfrom 6OcasesoflumberprolapsedvertebraldiscandtheRNA wereextractedusingthree