人恒牙牙髓干细胞体外定向诱导分化为成骨细胞的研究.pdfVIP

旦腔医学 2011年第 19卷第3期 BeijingJournalofStomatology June2011，Vo1．19。No．3 人恒牙牙髓干细胞体外定向诱导分化为 成骨细胞的研究 李景辉 张方明 张振庭 【摘要】 目的 研究人恒牙牙髓组织来源的牙髓干细胞在体外分化为成骨细胞的能力，探讨其作为骨组织工 程种子细胞的可行性。方法 从正畸治疗减数拔除的恒前磨牙中分离牙髓组织，应用酶消化法获得牙髓细胞。单 抗 Stro-1标记、免疫磁珠阳性分选系统分选获得牙髓干细胞，第3代牙髓干细胞用成骨向诱导培养基向成骨细胞诱 导分化。用碱性磷酸酶染色和VonKossa染色鉴定成骨向分化 ，RT．PCR检测成骨细胞 的特异相关或标志基 因。 结果 人恒牙牙髓干细胞经成骨向培养基诱导后表现出成骨细胞特性，碱性磷酸酶和VonKossa染色结果均为阳 性 ，RT-PCR检测成骨向分化相关基因I型胶原、骨涎蛋 白、骨钙素、Runx2和Osterix均有阳性表达。结论 恒牙牙 髓干细胞具有向成骨细胞分化的潜能，有望成为骨组织工程的种子细胞。 【关键词】 牙髓干细胞；成骨细胞；分化；组织工程 【中图号】 R318．5 【文献标识码】 A 【文章编号】 1006-673X(2011)03-0139-05 Definitivedifferentiationfrom humandentalpulpstem cellstoosteoblastinvitro l_JJing—hui，ZHANGFang-ming， ZHANGZhen-ting．DepartmentofStomatology，BeringFriendshipHospitalCapitalMedicalUniversity，Beqing100050， China 【Abstract】 Objective Toinvestigatethefeasibilityofdirectionallyinduceddifferentiationofhumandentalpulp stemcells(HDPSCs)towardosteoblastsinvitro．Methods Humandentaluplpcells(HDPCs)wereseparatedand cultured from dentM pulp ofhealthypremolarsextracted fororthodonticup rpose．HDPSCswere isolated from cultured HDPCsbymagnetic-activatedcellsortingS(MACS)indirectmagneticcelllabelingandpositiveselectionstrategy’vitIl natibodyStro—l，andthentheywereinducedtodifferentiationbyosteogenicmedium．0steogenicdifferentiationwasassessed by VonKossanadalkalinephosphatasestaining．andexpressionsofosteoblastspecificgeneswer-eexaminedbyRT- PCR．Results DPSCsoulddifferentiateintoosteoblasts．ALPwasexpressedandmineralizednoduleswereobservedafter inductionofHDPSCs．ThegenesrelatedtoosteogenicdifferentiationwereexpressedincludingCOLI，BSP，OC，Runx2and Osterix．Conclusion DPSCsarepromisingseedceilsforbonetissueengineering． 【Keywords】 Humandentaluplpstemcells；Osteoblast；Differentiation；Tissueengineering 组织工程的目标是研究和开发生物替代物，用