N-（3-三氟甲基苯基）维甲酰胺对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响.pdfVIP

· 674 · 安徽医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2008Dec；43(6) N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺 对人肺腺癌 A549细胞增殖及凋亡的影响 姚梦醒 ，桂淑玉 ，何 苇 ，李 庆 ，周 青 ，陈飞虎。，汪 渊 摘要 目的 研究新合成的全反式维 甲酸(ATRA)衍生物 关系发现，大多数人肺癌细胞株对 ATRA有显著的 [N一(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺]对人肺腺癌A549细胞株 抗性作用 J。因此人们不断的寻找和研发ATRA 体外增殖及凋亡的影响。方法 3种浓度的ATRA衍生物 衍生物，以达到提高肺癌治疗效果又能减轻毒副反 和ATRA(1、5、10mg／L)分别处理 A549细胞 1、2、3、7d，应 应的目的。本研究 旨在探讨新合成的ATRA衍生物 用MTI法和流式细胞技术分别观察该ATRA衍生物对A549 [N，(3一三氟 甲基苯基)维 甲酰胺 ，N一(3-trifluorom— 细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响；Westernblot分析凋亡相 ethyl—pheny1)一ret—inamide，图 1]对人肺腺癌细胞 关蛋白表达的变化。结果 ATRA衍生物处理组 A549细胞 A549增殖、凋亡等方面的影响，并对其机制进行初 增殖抑制率随药物浓度 的增加而提高，分别为 9．1％、 步探讨 。 17．8％、47．O％；抑制率亦随药物作用时间的延长而提高，分 别为 18．1％、20．6％、40．4％、83．4％。10mg／LATRA衍生 物可明显诱导A549细胞凋亡 ，凋亡率达到40．9％，G。～G F 期细胞比例明显下降，细胞凋亡峰较对照组明显提前 ，凋亡 过程伴随Bcl一2表达下降，而 Bax、Bak、酶原形式 的Caspase一 3、p53、NF—KB的表达无明显变化。结论 ATRA衍生物对 A549细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性；并诱导细 图1 N·(3-三氟甲基苯基)维 甲酰胺结构式 胞凋亡，可能与Bcl一2蛋白的表达下调有关。 主题词 肺肿瘤；腺癌；细胞增殖／药物作用；细胞凋亡／药物 作用；流式细胞术 ；细胞系 1 材料与方法 自由词 N (3-三氟甲基苯基)维甲酰胺；MTT；Bcl一2 1．1 试剂 ATRA购 自Sigma公司，ATRA衍生物 中图分类号 R734．2；R977．21；R979．1；R965．1 由安徽医科大学药学院合成，二者皆用二甲基亚砜 文献标识码 A 文章编号 1000—1492(2008)06—0674—05 (DMSO)配制成终浓度分别为 1、5、10mg／L，分装后 于一20℃避光保存，DMSO的终浓度 0．1％。MTT 肿瘤的诱导分化及凋亡治疗是当今的研究热点 购 自Sigma公司。CoulterDNA检测试剂盒 由安徽 之一。全反式维 甲酸(all—transretinoicacid，ATRA) 省立医院中心实验室馈赠。 是 目前比较理想的诱导分化凋亡剂。1988年王振 1．2 细胞培养 人肺腺癌 A549细胞株 由本实验 义等 ¨将其成功地应用于治疗急性早幼