靶向巨噬细胞移动抑制因子的siRNA对小鼠大肠癌肝转移的影响.pdfVIP

2011年 9月第 28卷第 9期 ChinJ 2Ol1．Vo1．28．No．9 · 1495 · · 实 验 研 究 · 靶 向巨噬细胞移动抑制因子的 siRNA对 小 鼠大肠癌肝转移 的影响 杨荣娇 王丽京 臧林泉 王亚敏 吴礼浩 舒阳春 何兴祥 【摘要】 目的 探讨靶向巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的小干扰 RNA(siRNA)对BALB／C小 鼠大肠癌肝转移的影响及其可能的机制。方法 盲肠造疝原位接种瘤块法建立 BALB／C小鼠大肠 癌肝转移模型。将成功建模的小 鼠随机分为3组。分别每周2次肿瘤原位注射相同体积的靶向 MIF的siRNA(MIFsiRNA，0．15ng／kg)、非特异性 siRNA(NS—siRNA，0．15ng／kg)及生理盐水 (Ns， 0．15ng／kg)，治疗 4周。治疗结束 3d后，处死小鼠。肝脏连续切片，苏木素-伊红 (HE)染色观察各 组大肠癌肝转移 ；酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测血清 MIF及血管内皮生长因子 (VEGF)浓度；免 疫组织化学染色检测肝转移灶微血管密度 (MVD)。结果 MIFsiRNA组、NS—siRNAR组及NS组的 大肠癌肝转移率分别为 10％、60％与70％(X2=8．30，P0．05)，小鼠血清MIF分别为 (20±4)、(72 ±8)与 (78±7)ng／L(P0．05)；小鼠血清VEGF分别为 (20±4)、(77±9)与 (77-4-10)ng／L(P 0．05)；肝转移灶的MVD分别为 194-3、29-46与35-47(P0．05)。结论 靶向MIF的siRNA降低 了小鼠大肠癌肝转移的发生率 ，其机制可能是靶向MIF的siRNA抑制了MIF表达，下调VEGF的表 达，减少了MVD。 【关键词l 大肠癌； MIF； siRNA； 转移 Effectsofmacrophagemigration inhibitoryfactorsiRNA on hepaticmetastasisofltlollse colonic cancer YANGRong-jiao ，WANGLi-jing，ZANGLin—quan， ⅣGYa—rain，WULi—hao，SHUYang— chun，HE ng-xiang．DepartmentofGastroenterology，theFirstAffiliatedHospitalofGuangdongUniversi一 ￡yor尸nrtm~y．Guangzhou51I9 D，C ina Correspondingauthor：HEX吨 一xmng．Email：xingxianghe@medmail．corn．cn A【bstract】 Objcetive Toinvestigatetheeffectsofmacmph~emigrationinhibitoryfactor(MIF) smallinterferingRNA (siRNA)，asiRNAtargetingMIFonhepaticmetastasisinaBALB／Cmousemodel ofcoloniccancer．M ethods Orthotopictransplantationoffresh colorectalcancertumorfragmentsintoher- nialsacofcecuIUwasusedinaBALB／Cmousemodelofcolorectalcancer．Thirtymousemodelsweredi— videdrandomlyintothreegroupsandtreatedrespectivelywithMIFsiRNA (0．15ns／kg)，NC—MIFsiRNA nad／lO／／I1alsaline(NS)twiceaweek．intratumorally．After4thweek．miceweresacrificedandthetotal liversweremadeintoserialslicestodetecttheoccurrenceofhepaticmetastasis．Enzymelinkedimmu— nosorhentassay(EUSA)wasusedtotesttheserumMIFandvascularendotlle