雷利度胺单独及联合硼替佐米抑制KM3细胞生长、诱导凋亡的机制研究.pdfVIP

· l302· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(7)：1302—1308 [文章编号] 1000—4718(2011)07—1302—07 雷利度胺单独及联合硼替佐米抑制 KM3细胞生长、 诱导凋亡的机制研究 王 清 ， 李 娟 ， 谷景立， 刘俊茹， 曾丽金 (中山大学附属第一医院血液科，广东 广州510080) [摘 要] 目的：观察雷利度胺 (1enalidomide)单药及联合硼替佐米 (bortezomib)诱导多发性骨髓瘤 (MM) KM3细胞凋亡的作用，并初步探讨其机制。方法：应用 台盼蓝拒染法检测单药雷利度胺及与 bortezomib联合对 KM3细胞生长抑制的影响；应用流式细胞术检测细胞凋亡；应用RT—PCR方法检测p65mRNA的表达情况；应用 Westernblotting检测P65(protein65)、pP65(phosphorylatedp65)、PARP[polyADP(ribose)polymerase]及caspase一3、 一 8、一9蛋白的表达变化。结果：雷利度胺可以抑制 KM3细胞生长，抑制 p65mRNA及其蛋白的表达 ，并激活 caspase一8、一3及PARP，诱导细胞凋亡。雷利度胺与bortezomib联合时有协同促细胞凋亡作用。结论：雷利度胺 单独作用于KM3细胞可以抑制其生长并诱导细胞凋亡，与bortezomib联用时有协同效应。 [关键词] 雷利度胺；硼替佐米；细胞凋亡；多发性骨髓瘤 [中图分类号] R733．3 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．07．010 Lenalidomidealoneorcombinedwithbortezomib inhibitsgrowth andin． ducesapoptosisinKM3cells WANGQing，LIJuan，GUJing—li，LIUJun一131，ZENGLi—jin (DepartmentofHematology，TheFirstAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China．E—mail： luliyuan@tom．eom) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsoflenalidomidealoneorcombinedwithbortezomiboninductionof apoptosisinmultiplemyeloma(MM)KM3cells．METHODS：TheKM3cellsweretreatedwithlenalidomidealoneoreom- binedwithbortezomib．Thenumberofviablecellswasdeterminedbytrypanblueexclusion．Apoptoticcellsweresimuha· neouslystainedwithannexinV—FITC andPIanddetemr inedbyflow cytometry．RT—PCRwasusedtoexaminethelevel ofp65mRNA．WesternblottingwasusedtoexaminetheproteinlevelsofP65，pP65，caspase一3，一8，一9，andpoly (ADP—ribose)polymerase(PARP)．RESULTS：Lenalidomide—inhibitedthecellgrowthandinducedapoptosisofKM3 cells．Themechanism responsibleforlenalidomide—mediatedinhibitionwasviaNF—KBandactivationofcaspase—medi— atedinductionofapoptosis．Asynergisticeffectwasobservedwhencombinat