猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型和猪瘟病毒混合感染的诊断与防制分析.pdfVIP

2012第 2期 养猪 SWINEPRODUCTION 81 猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒 2型和 猪瘟病毒混合感染的诊断与防制分析 夏 伟 2，李 鹏 ，危艳武s，张宇辉 ，罗玉均 ，冯春复。 (1．黑龙江八一农垦大学，黑龙江 大庆 163319；2．哈尔滨维科生物技术开发公司，哈尔滨 150069； 3．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室，哈尔滨 150001) 中图分类号：$858．285．3 文献标志码 ：A 文章编号：1O02—1957(2012)02—0081—03 摘 要：2011年 12月，上海某大型猪场暴发以母猪流产、产死胎和弱仔，哺乳仔猪体温升高、皮肤 发绀、呼吸衰竭、顽固性腹泻，保育猪发烧、扎堆、皮肤红、昏睡、腹股沟淋巴结肿大为主要症状的疾 病，死淘率高。剖杀3头发病哺乳仔猪、3头死亡保育猪，取淋巴结、脾、肺脏病变组织，用PCR、RT— PCR方法分别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型、猪瘟野毒为阳性，结合本病的临床症 状和病理剖检，确诊为猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型、猪瘟病毒混合感染。 关键词 ：猪繁殖与呼吸综合征病毒；圆环病毒2型；猪瘟病毒；混合感染；诊断 猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS)是世界范围内一 性等6[]，给本病的防治带来很大困难。生产实践中， 种重要的猪传染病，1996年哈尔滨兽医研究所郭 PRRSV与PCV2混合感染 、PRRSV与CSFV混合感 宝清首次证实我 国有PRRS存在 [1j，并从繁殖障碍 染网、CSFV与PCV2混合感染9【】j交为常见。本试验应 猪群分离到猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)[2／。 用 PCR、RT—PCR方法结合临床症状与病理剖检， 近几年对我国发病猪群的血清检测结果表明，该病 对 2011年 12月上海某猪场猪繁殖与呼吸综合征 现 已存在于我国大部分地区_引，并且呈暴发式流行， 病毒、圆环病毒2型、猪瘟病毒混合感染进行 了确 给养猪业造成很大的经济损失。特别 自2006年 “猪 诊，从而为猪场防制本病、制定合理的免疫程序提 高热病”流行后，据有关研究表明，猪繁殖与呼吸综 供科学依据 。 合征病毒变异毒株是由普通猪繁殖与呼吸综合征 1 材料与方法 病毒的NSP2段基 因发生缺失变异而来，其临床症 L1 病料来源 状主要是出现 “三高一低 ”，即高热 (40cIC以上)、高 来 自上海某猪场的3头发病哺乳仔猪和 3头死 发病率 、高死亡率、低治愈率 ；猪群出现皮肤发红， 亡保育猪的肺脏 、脾脏、淋巴结等脏器 ，共 6份，编 个别有神经症状 ，能导致母猪流产甚至死亡，给养 号，3、4、5号为哺乳仔猪，6、7、8号为保育猪，冷冻运 猪业的发展带来重创。猪 圆环病毒 2型 (PCV2)感 送，一20qC保存备用。 染已经是威胁 当前世界养猪业的一个重要疾病， 1．2 酶和其他试剂 1991年断奶仔猪多系统衰竭综合征 (PMWS)首次 PCR扩增试剂盒、饱和酚 、TauDNA聚合酶、 在加拿大被发现，目前 已证实呈世界性流行。PCV2 dNTPs、EB、DEPC、提取总 RNA用 Trizol，BioFlux公 感染引起的相关疾病在我国的流行情况也十分严 司产品；Cycle—PureKit，OMEGA公司产品；DL2000 重，给养猪业造成巨大的经济损失[4I5]。我国学者在 Marker、TaKaRaRNAPCRKitfAMV1Ver-3．0购 自宝生 我国许多地方都分离出该病毒，且与其他病毒混合 物工程 (大连)有限公司；其他试剂均为分析纯试剂。 感染的情况 日益明显，PCV2感染病例在临床上经 1．3 引物设计与合成 常可见 。猪瘟是 由猪瘟病毒 (CSFV)引起的一种高 根据 GenBank发表的PRRSV基 因序列 (AYO 致死性烈性传染病 。近几年随着我国规模化养猪 32626~AY262352)，用 Oligo6．0软件设计引物。上游 业的发展，猪瘟的发生出现一些新特点，表现为发 引物：5-AGAACTGTGACAACAACGCTG一3，下游引 病年龄小、散发流行、混合感染 以及非典型性或隐 物：5-GAGTCGA