海岸带沉积物环境中甲烷代谢茵的富集培养及混合茵群分析.pdfVIP

第30卷 第 3期 台 湾 海 峡 Vo1．30．No．3 2011年 8月 JOURNAL OF OCEANOGRAPHY IN TAIWAN STRAIT Aug．，2011 海岸带沉积物环境 中甲烷代谢茵的 富集培养及混合茵群分析 于丽波，姜丽晶，汤熙翔 (国家海洋局第三海洋研究所 、国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室，福建 厦门361005) 摘要：结合Hungate无氧分离技术，对海岸带沉积物中甲烷代谢菌进行了富集培养，分别为珠江口的甲烷 产生菌和九龙江口的甲烷氧化菌及其他甲基氧化菌．其研究结果表明：在珠江口淇澳岛海岸带沉积物中， 甲烷八叠球菌属(Methanosarcina)为优势菌株，分布于沉积物的上、中、下3个层位，并发现了部分序列与 不可培养的泉古菌门(Crcnarchaeota)的杂色泉古菌(miscellaneouscrenarchaeoticgroup，MCG)的相似度 为90％～99％．在九龙江口的海岸带沉积物环境中，噬甲基菌属(Methylophaga)为优势菌群，在富集产物 菌群多样性中占60％～99％；还有一些相似度较低(为95％-97％)的菌群，为潜在的新种． 关键词：海洋微生物学；甲烷产生菌；甲基氧化菌；沉积物；杂色泉古菌(MCG)；富集培养；珠江口；九 龙 江 口 DOI：10．3969／J．ISSN．1000—8160．2011．03．014 中图分类号：Q178．53 文献标识码：A 文章编号：1000—8160(2011)03-0386438 大气 中的甲烷是引起全球性气候变暖的重要温 甲烷氧化菌是 以甲烷作为生长的惟一碳源和能源 室效应气体之一．虽然 甲烷在大气 中的浓度低于二 的微生物．甲烷氧化菌于 1906年首次被分离出 氧化碳，但它的热吸收率却是二氧化碳的30倍 ¨． 来[83．1970年Whittenbury等人分离和鉴定了 100 在引起全球气候变暖方面其仅次于二氧化碳，对温 多种能利用 甲烷的细菌 J，为现代 甲烷氧化菌的 室效应的贡献率约占温室气体贡献总量的15％E2]． 分类奠定了基础． 目前大气中甲烷的总质量约为4700t，年释放量为 到 目前为止，对海岸带沉积物环境 中产 甲烷 500t，其 中70％(m／m)源于生物活动¨．由微生物 菌和 甲烷氧化菌的富集培养研究 尚未见到报道． 活动产生的甲烷 占大气中甲烷的80％(m／m)以上， 本研究对珠江 口和九龙江 口2个海岸带的沉积物 一 部分 甲烷被微生物的生长所利用．因此，大气中的 环境中的甲烷代谢菌进行富集培养和菌群多样性 甲烷绝大部分是甲烷产生菌和甲烷氧化菌相互作用 分析 ，以了解海岸带沉积物中可培养的甲烷代谢 的结果 J．基于此，对 甲烷产生菌和 甲烷氧化菌进 菌的菌群多样性特征，为今后对 甲烷代谢微生物 行研究，无论是在解决能源问题还是在解决环境问 与海岸带生态环境之间关系的研究提供了实验基 题上都具有重大意义． 础资料． 产 甲烷菌和甲烷氧化菌是微生物介质甲烷循环 的主体 ．对产 甲烷菌的研究始于 1899年，Omelian— 1 材料与方法 sku等(2003)将厌氧分解纤维素的微生物分为两 1．1 沉积物样品的采集 类 ：一类 是产氢 的细菌，一类 是产 甲烷细菌 J． 沉积物样品一部分于2o08年 11月采于珠江 口 1950年，Hungate创造了无氧分离技术 ，使对严格 淇澳岛北海岸带 (22。272l”N，113。3807E)，另一 厌氧的产 甲烷菌 的研究得到了迅速的发展 ．到 部分样品于2008年 12月采 自九龙江 口东南海岸带 目前为止，已有 2