核因子κB、结缔组织生长因子和转化生长因子β_1在肝纤维化中的表达及临床意义.pdfVIP

《I临床荟萃》 2011年9月20日第2鲞 第一18~] Clinica—lFocus,September20—,2011,Vol26,No．18 核因子 KB、结缔组织生长因子和转化生长因子 ， 在肝纤维化中的表达及临床意义 周智宏 ，赵 静。 (1．河北联合大学附属医院 消化 内科 ，河北 唐 山 063000；2．河北联合大学 病理系，河北 唐山 063000) 关键词 ：肝硬化 ；NF_KB；免疫组织化学 1．2 方法 按常规 的方法制作和处理切片：一抗采 中图分类号 ：R575．2 用鼠抗人 NF一B单克 隆抗体浓缩液 (稀释度 1： 文献标识码 ：B 100)(北京 中衫金桥生物技术有限公 司)；鼠抗 人多 文章编号 ：1004—583X(2011)18—1614—04 克 隆 CTGF浓缩液 (武汉博士德生物技术有 限公 肝纤维化 (HF)是指肝脏 内弥漫性 细胞外基质 司)；兔抗人 TGF～B 免疫组化多克隆抗体 (福州迈新 (EMC)特别是胶原过度沉积 。参与肝纤维化形成的 生物术开发有限公司)。二抗采用 即用型 EnVision 细胞因子主要有转化生长 因子 (TGF-13)、结缔组 免疫组织化学试剂盒(鼠／兔)(福州迈新生物技术开 织生长因子 (CTGF)、核因子 -cB(NF-B)、肿瘤坏死 发公司)。 因子 (TNF)、自细胞介素 6(IL一6)和肝细胞生长因子 1．3 阳性判断标准 NF—JcB以Kupffer细胞 、肝窦 (HGF)等 [1]。NF-~B是在纤维化中起重要作用的转 内的星状细胞、肝窦 内皮细胞和肝细胞胞质和胞核 录因子 。TGF一8是一组具有多种功能的蛋 白多肽， 中有棕黄色颗粒为阳性 。．CTGF主要分布在肝星状 TGF—B在体细胞系中所 占比例最高 (90 )，活性 细胞 的胞浆 ，阳性表达为棕黄色颗粒 。TGF—B 在正 最强 ，在肝纤维化 的形成过程 中，TGF—B 是最核心 常对照组肝组织中少量表达于部分肝细胞胞浆及肝 的细胞因子之一 [2]。CTGF在许多疾病 的致纤维化 窦中，呈棕黄色着色，在肝纤维化肝组织 中TGF— 作用中介导 了TGF一』3的许多功能 ，CTGF的表达常 表达 明显增强 ，阳性细胞数增多，在纤维间隔、汇管 与 TGF-~伴随升高_3]。因此 ，推测 CTGF是 TGF-~ 区内的炎细胞、成纤维细胞 、Kupffer细胞胞浆及肝 的下游介质。本研 究采用免疫组化 EnVision法检 窦内的星状细胞和窦内皮细胞 中呈棕黄色及棕褐色 测 NF-~B、CTGF和 TGF-t3在肝纤维化组织中的表 沉着 。每例随机取 10个不 同高倍视野各计数 100个 达，分析 NF—IcB、CTGF和 TGF—J3与肝纤维化 的关 细胞 ，按 阳性细胞所 占的百分比分为：5 计 0分；≥ 系 ，探讨三者之间的关系，以期对临床判断肝纤维化 5％～25 计 1分 ；25 ～50 计 2分；50 ～ 预后及指导治疗提供帮助 。 75 计 3分 ；75 计 4分 ；着色强度依据着色深浅 1 资料与方法 记分 ：无着色为 0分 ，浅黄色为 1分 ，棕黄色为 2分， 1．1 研究对象 2006年 10月至 2009年 1O月华北 深棕褐色为 3分 。蛋白表达程度计分：阳性细胞所 占 煤炭医学院附属医院及唐山传染病 医院门诊及住院 的百分数计分 ×着色强度计分 1．9为阴性 (一)；≥ 收治的慢性乙型肝炎 42例 、乙型肝炎后肝硬化患者 1．9～2．9为弱阳性 (+)；2．9～3．9为阳性 (++)； 15例 。5