钙离子对猪ICSI胚胎表达EGFP效率的影响.pdfVIP

中国科技论文在线 钙离子对猪ICSI 胚胎表达EGFP 效率的影 响# ** 张静，曾申明 5 （中国农业大学动物科技学院，北京，100193 ） 摘要：本实验研究操作液中的钙离子浓度对猪ICSI 胚胎表达EGFP 效率的影响。冻融的精子 和0.05μ g/ml 的pEGFP-N1DNA 在4OC 孵育1 小时，然后分别在钙离子浓度为0，2，4，6， 8mmol/L 的 TL-Hepes 操作液中注入体外成熟培养的猪卵母细胞内。结果表明，无论是否进 10 行电激活，操作液中钙离子浓度可以显著影响 ICSI 胚胎表达 EGFP 的效率。当钙离子浓度 为0mmol/L 时，胚胎表达EGFP 的效率显著低于其他各组（P0.05）。因此我们得出结论： 显微操作液里的钙离子浓度可以影响猪ICSI 胚胎表达EGFP 的效率。 关键词：猪；转基因；ICSI ；钙离子 中图分类号：S814.8 15 The effects of calcium on the expression efficiency of EGFP in porcine-ICSI embryos Zhang Jing, Zeng Shenming (College of Animal Science and Technology, China Agricultural University, Beijing 100193) 20 Abstract: The effects of calcium concentration in manipulated media on the expression efficiency of EGFP in porcine-ICSI embryos were investigated in this study. Frozen-thawed sperm incubated with 0.05μg/mL pEGFP-N1 DNA at 4 0C for 1 h were injected into oocytes matured in vitro in the TL-Hepes media with 0, 2, 4, 6, 8 mmol/L Ca2+ respectively. The results demonstrated that Ca2+ concentration significantly affected efficiencies of ICSI embryos expressing EGFP 25 regardless of electro-activation. The percentage of embryos expressing EGFP in 0 mmol/L group was significantly lower than other groups （P0.05 ）. In conclusion, Ca2+ concentrations in manipulated media could affect the expression efficiencies of EGFP in porcine ICSI embryos 。 Key words: Porcine; transgene; ICSI; Calcium 0 引言 30 转基因动物指通过基因工程技术将目的基因导入生殖细胞、早期胚胎干细胞或早期胚胎 并整合到受体细胞的基因组中，经过各种发育途径形成所有细胞都包含目的基因的个体，称 转基因动物。转基因动物具有广阔的应用前景，如转