光谱法研究Cu2诱导的不同时间的LDL体外氧化.pdfVIP

第29卷，第5期 光谱学与光谱分析 2 009年5月 and May，2009 SpectroscopySpectralAnalysis 光谱法研究Cu2+诱导的不同时间的LDL体外氧化 孙 霞1，刘庆平1’孙，郑学仿1’2，刘哲1，王仁军1，黄振宇1，张帆1 1．大连大学生物T程学院，辽宁大连116622 2．大连大学辽宁省高校生物有机化学重点实验室．辽宁大连116622 low 摘要氧化低密度脂蛋白(oxidized lipoprotein，oxLDI，)被认为是动脉硬化的关键致病因素。 density 文章综合运用紫外吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及圆二色(circulardichroism．CD)光谱研究了CC+诱 加，其相对应的430nln处的荧光强度也随之加强，氧化过程中生成了新的氧化产物。氧化低密度脂蛋白紫 改变了apoB-100的构象进而导致了生色基团的微环境的变化。 关键词 氧化低密度脂蛋白；紫外光谱；荧光光谱；同步荧光光谱；圆二色(CD)光谱 中图分类号：0657．3文献标识码：A DOI：10．3964／j．issm1000-0593(2009)05—1386—04 特点。本文综合运用紫外光谱，荧光光谱，同步荧光光谱和 引 言 圆二色(circular 同时间的I，DI。体外氧化过程。分别从apoB-100生色基团的 近年来，心血管疾病成为影响人类健康的重大因素。动 暴露程度，氨基酸残基的微环境，蛋白质的二级结构和生成 脉硬化又是心血管疾病中的顽症，患病率和死亡率都很高。 的氧化产物等多方面的变化来研究LDL的氧化过程。结果 low 巨噬细胞摄取氧化低密度脂蛋白(oxidizeddensitylipo— 开，进而导致生色基团的微环境变化，紫外吸收强度增强， protein，oxLDL)句ll速炎症反应，平滑肌细胞的增殖和动脉壁 特征荧光强度下降，氧化产物逐渐增加。本文为用光谱法研 上单核细胞的分化都表明oxLDL在早期的动脉硬化形成中 究oxLDL提供了有价值的实验数据和理论依据。 起到关键作用[1]。oxLDI，是血浆中的主要胆固醇携带者，在 血浆中的水平代表了动脉粥样硬化的风险水平[2J。低密度脂 1实验部分 蛋白(10w nln的球体 densitylipoprotein，LDL)是直径约22 颗粒，U)I。的唯一组成蛋白载脂蛋白B-100(apolipoprotein 1．1仪器和试剂 B-100，apol3-100)呈网状包绕其脂质核心[3]。LDI。的氧化修 饰是指LDL脂类中的多不饱和脂肪酸发生的过氧化作用H]。 多不饱和脂肪酸的过氧化及其产物可以使I．DL的组成成分、 结构和生物学特性发生改变，这样改变了的LDI。称为OX— U)L。氧化过程中apoB-100构象的变化直接影响它的结合性 质，进而影响I．DI。的结构和功能[5]。所以研究氧化后apoB- 磷酸盐缓冲溶液(PBs)，MDA试剂盒(南京建成生物工 100的结构与功能以及由此结构产生的致病因素是很有必要 程研究所)，所用试剂均为分析纯，实验用水为二次去离子 的。