罗非鱼鱼皮抗氧化肽的制备及分离纯化.pdfVIP

第３９卷 第１期 昆明理工大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．３９　Ｎｏ１ 　 ２０１４年２月　 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＫｕｎｍｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ） 　 Ｆｅｂ．２０１４  ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－８５５ｘ．２０１４．０１．０１７ 罗非鱼鱼皮抗氧化肽的制备及分离纯化 庄永亮，张玉锋 （昆明理工大学 化学工程学院，云南 昆明６５０５００） 摘要：以罗非鱼鱼皮为原料制备鱼皮胶原蛋白，利用正交试验确定碱性蛋白酶和中性蛋白酶的 最适水解条件，并进一步确定双酶复合水解最佳条件．结果表明，中性蛋白酶和碱性蛋白酶连续 水解方式制备的胶原蛋白水解液具有最高的水解度和羟自由基清除能力．将该水解液依次通过 ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶色谱柱、ＳＰＳｅｐｈａｄｅｘＣ－２５阳离子交换色谱柱、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５凝胶色谱 柱和反向高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）进行分离纯化，得到了一种氨基酸序列为Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ 的抗氧化肽，其分子量为３１７３３Ｄａ，该肽对羟自由基清除能力的ＩＣ值为４６１ ｇ／ｍＬ．本文为罗 ５０ μ 非鱼鱼皮胶原蛋白制备抗氧化肽提供了科学依据． 关键词：罗非鱼鱼皮；胶原蛋白；抗氧化肽；正交试验；氨基酸序列 中图分类号：ＴＳ２５４９ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００７－８５５Ｘ（２０１４）０１－００８７－０７ ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＰｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＴｉｌａｐｉａＳｋｉｎ ＺＨＵＡＮＧＹｏｎｇｌｉａｎｇ，ＺＨＡＮＧＹｕｆｅｎｇ （ＦａｃｕｌｔｙｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＫｕｎｍｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０５００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｉｌａｐｉａｓｋｉｎｇｅｌａｔｉｎ（ＴＳＧ）ｉｓｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｔｈｅｒａｗｍａｔｅｒｉａｌｏｆＴｉｌａｐｉａｓｋｉｎＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｎｅｕｔｒａｓｅａｎｄａｌｃａｌａｓｅｉｓｔｈｅｎｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｕｓｉｎｇｔｈｅｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ａｎｄｄｏｕｂｌｅｅｎｚｙｍｅｈｙ ｄｒｏｌｙｓｉｓｉｓｆｕｒｔｈｅｒａｐｐｌｉｅｄｔｏｏｂｔａｉｎｔｈｅｂｅｓｔｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｇｅｌａｔｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅＴｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｔｈａｔｔｈｅｇｅｌａｔｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｕｓｉｎｇｎｅｕｔｒａｓｅａｎｄａｌｃａｌａｓｅｈａｓｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔＤＨａｎｄｈｙｄｒｏｘｙｌｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙＴｈｉｓｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｉｓｐｕｒｉｆｉｅｄｔｈｅｒｅａｆｔｅｒｂｙｕｓｉｎｇＳｅｐｈａｄｅｘＧ －２５ｇｅｌｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＳＰＳｅｐｈａｄｅｘＣ－２５ｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５ｇｅｌｆｉｌ ｔｒａｔｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄＲＰ－ＨＰＬＣＡｎａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｅｐｔｉｄｅｉｓｏｂｔａｉｎｅｄＩｔｓａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｓａｒｅｉｄｅｎｔｉ ｆｉｅｄａｓＧｌｕ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ，ａｎｄｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｉｓ３１７３３Ｄａ．ＴｈｅＩＣ ｖａｌｕｅｏｆｔｈｉｓｐｅｐｔｉｄｅｏｎｈｙｄｒｏｘｙｌｒａｄｉ ５０ ｃａｌｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｓ４６１ ｇ