大鼠比目鱼肌梭内肌纤维的分离方法.pdfVIP

生理学报Acta Physiologica Sinica , August 25, 2013, 65(4): 461–465 461 实验技术 大鼠比目鱼肌梭内肌纤维的分离方法 1 2,* 3 赵雪红 ，樊小力 ，刘广斌 1 441053 2 710061 3 湖北文理学院医学院机能学部，襄阳 ；西安交通大学医学院生理教研室，西安 ；南昆士兰大学生物和物理 科学系，图文巴，昆士兰，澳大利亚 摘 要：梭囊的存在限制了人们对肌梭功能及其机制的深入研究，本研究旨在建立将梭内肌纤维从梭囊中分离出来的方法。 应用混合酶液消化的方法，分离大鼠比目鱼肌的梭内肌纤维，使用不同的培养基溶液进行培养，用台盼蓝染色法检测细胞 - DMEM 活性，用膜片钳技术检测静息膜电位。结果显示，氨基酸 生理盐溶液中梭内肌纤维几乎全部坏死， 培养基虽能较好 CO Leiboviz’s 15 (L-15) 1~2 h 地维持细胞状态，但是对 含量要求较高，而 培养基能够维持梭内肌纤维的正常形态和功能达 ； 2 - - 和常规处理过的盖玻片相比，用明胶 多聚赖氨酸 血清处理过的盖玻片上梭内肌纤维更易贴壁；分离出的梭内肌纤维静息膜 电位为(−45.3 ± 5.1) mV，显示纤维的功能状态良好，能够满足电生理实验的要求。本研究为进一步研究梭内肌纤维的功能 及其机制奠定了良好的方法学基础。 关键词：肌梭；梭内肌纤维；静息膜电位 中图分类号：R338 Method of isolation of intrafusal fibres of muscle spindle in soleus of rats 1 2* 3 ZHAO Xue-Hong , FAN Xiao-Li , LIU Guang-Bin 1Medical Function Department, Medical College of Hubei University of Arts and Science, Xiangyang 441053, China; 2Department of Physiology, Medical College of Xi’an Jiaotong University, Xi’an 710061, China; 3Department of Biological and Physical Sciences, University of Southern Queensland, Toowoomba, Queensland, Australia Abstract: Capsule restricts the further study on muscle spindle function and the involved mechanism. The aim of this study was to es- tablish the isolation method of intrafusal fibres from the isolated rat muscle spindle.