黄喉拟水龟巨噬细胞炎症蛋白+3α重组表达及抗菌活性分析.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 黄喉拟水龟巨噬细胞炎症蛋白重组表达及抗菌活性分析 龙建杰 朱新平 史 燕 赵 建 洪孝友 中国水产科学研究院珠江水产研究所 农业部热带亚热带水产种质资源利用与养殖重点实验室广东 广州 上海海洋大学水产与生命学院上海 摘要 巨噬细胞炎症蛋白是一种可诱导的分泌蛋白通过相应受体对多种免疫细胞产生趋 化在多种疾病的免疫反应和炎症损伤中发挥重要作用 实验采用 技术克隆出黄喉 拟水龟巨噬细胞炎症蛋白 的成熟肽基因序列通过双酶切将目的基因序列插 入到表达载体上然后转化进大肠杆菌 中经 诱导后表达出了 融合蛋白以该融合蛋白为抗原制备多克隆抗体并进行 鉴定及抑菌性 检测 实验表明融合蛋白在 条件下得到高效表达经 凝胶电泳和 分析显示所表达融合蛋白相对分子量为 与预测蛋 白大小一致并与带标签的多克隆抗体发生特异性反应 经 镍柱纯化后 电泳检测出现单一条带说明获得了纯度较高的 重组蛋白 抑菌实验表明 重组蛋白对金黄色葡萄球菌粘质沙雷氏菌和嗜水气单胞菌都有较强的抑菌作用 关键词 黄喉拟水龟 巨噬细胞炎症蛋白 重组表达 抗菌活性 中图分类号 文献标志码 黄喉拟水龟 是我国南方 对 进行原核表达对表达蛋白进行了 常见的土著龟种具有较高的观赏药用及食用价 纯化与复性同时制备了所得蛋白的多克隆抗体 值随着其人工繁殖及饲养的成功 已逐渐显 并进行 鉴定与抑菌性分析为后 示出良好的经济前景 目前为华南地区主要养殖 续蛋白功能研究打下基础 龟种之一 巨噬细胞炎症蛋白 材料与方法 又名 是一种强 主要试剂及菌种 力趋化蛋白 其已知的唯一受体为 由未 大肠杆菌 成熟 细胞记忆 细胞调控 细胞等上 酶 皮类细胞表达 其对免疫细胞有很强的趋化 作用 研究显示 具有一定的限制性 购自宝生生物工程大连有限公司 购自公司宽分 表达部位仅在粘膜和炎症上皮组织中表达 子量质粒小提试剂盒购自天根生化科技北 在胸腺器官中表达明显 的受体 京有限公司 底物显色试剂盒 是调节性 细胞的标志之一