罗非鱼源无乳链球菌ZQ0910转录调控因子_i_rovS__i_基因的克隆及表达研究.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 罗非鱼源无乳链球菌 转录调控因子 基因的克隆及表达研究 王 蓓 简纪常 鲁义善 蔡双虎 黄郁葱 汤菊芬 李桂欢 吴灶和 广东海洋大学水产学院广东 湛江 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东 湛江 仲恺农业工程学院广东 广州 摘要 为了对罗非鱼源无乳链球菌 株毒力相关转录调控因子进行克隆及表达研 究实验根据 上登录的相关基因设计引物采用 方法扩增该株细菌的 基 因然后将该基因定向克隆到原核表达载体 中在大肠杆菌 中进 行诱导表达 结果显示该基因有 个碱基编码 个氨基酸同源基因序列比对显 示无乳链球菌 株与无乳链球菌 与 的 基因的同源性最高 经诱导后表达的融合蛋白分子量为 用亲和层析后的融合蛋白免疫新西兰大白兔 制备多克隆抗体经 检测效价达到 研究结果表明实验成功克隆与表达了 基因为深入探讨调节因子在调节细菌的代谢生长和毒力等多种生命活动中的作 用提供了理论依据 关键词 无乳链球菌 转录调控因子 克隆 原核表达 中图分类号 文献标志码 无乳链球菌 是一 细菌为了在宿主体内的不同器官中定植和 种革兰氏阳性链球菌因最先从患乳房炎的牛中 生存它必须感受外界不断变换的环境高效率 分离而得名 近年来在我国广东广西海南等 地产生响应从而精准地调控特定基 因的表 省罗非鱼养殖地区频频出现范围较大的无乳链球 达 由于随时要涉及到众多基因的协同作 菌引起的爆发性病害这使得罗非鱼具有强抗病 用因此对细菌来说最有效率的方式莫过于通 力不易患病的观点受到了挑战 本实验室研 过众多转录调控因子的相互作用形成一个精 究团队分赴广东广西和海南省各罗非鱼主养区 密的全局调控网络来大批量地调控整个基因组 采集多个罗非鱼养殖场的发病鱼样本开展病原 的表达 我们通过比较基因组学分析除了 菌分离理化分子鉴定及强弱毒株的筛选等流行 找到一些传统已知的毒力因子如荚膜多糖和溶 病学调查工作最终确定编号为 株为罗 血素等基因之外有一些新的毒力相关的转录 非鱼源无乳链球菌 强 调控因子得以鉴定如毒力相关转录调控因子 毒株并完成了该株菌的全基因序列的测序草图 二元信号转导系统等等 转录调控 绘制及基 因注释等工作 登录号为 因子