氯霉素ELISA检测试剂盒的研制及其性能测试.pdfVIP

第 卷 第 期 中 国 食 品 学 报 7 6 Vol.7 No.6 年 月 200712 Dec. 2007 氯霉素ELISA检测试剂盒的研制及其性能测试 郭逸蓉 桂文君 王姝婷 朱国念 (浙江大学农药与环境毒理研究所 杭州 ) 310029 摘要 采用包被多克隆抗体直接竞争 法建立了氯霉素残留的酶联免疫分析方法,并构建了氯霉素残留 ELISA 检测试剂盒。研究结果表明,所选用的抗体对氯霉素亲合力强、特异性高,试剂盒对氯霉素残留检测的线 ELISA 性范围为 ,检测限( ) ,样品的加标回收率 。试剂盒性能测试结果表明, 0.24~250ng/mLIC0.47ng/mL 70%~130% 10 其准确性和重现性较好,保存期至少6个月,可用于虾肉、鸡肉、蜂蜜、鲜奶样品中氯霉素残留的批量快速、廉价 检测。 关键词 氯霉素 酶联免疫吸附分析 试剂盒 文章编号 ( ) 1009-7848200706-0118-06 氯霉素( , )是第一个采用 本文选用抗氯霉素琥珀酸单酯( )多 chloramphenicolCAP CAP-HS1 化学合成法生产的抗生素,对多种病原菌具有较 克隆抗体,采用包被抗体-酶标半抗原直接竞争 强的抑制作用。由于其效高价廉,曾被广泛应用于 法构建氯霉素残留酶联免疫检测试剂盒, ELISA 各类家禽、家畜、蜜蜂和水产品的各种传染病的防 并与国内外同类商用试剂盒进行了性能对比试验。 治。然而,氯霉素存在着严重的毒副作用,能引起 人的再生障碍性贫血、粒状白细胞缺症以及新生 1 材料与方法 儿、早产儿灰色综合症等,对人类健康构成巨大的 材料与仪器 1.1 [1～2] 潜在威胁 。因此,氯霉素残留问题已引起国际组 材料与试剂 氯霉素标准品,浙江大 1.1.1 99.1% 织和许多国家及地区的高度重视。近年来欧盟、美 学动物科学学院提供; 甲砜霉素标准品,浙 99.4% 国等发达国家已相继禁止氯霉素用于动物源性食 江润康药业有限公司;氟甲砜霉素标样、四环素标 品 [3～4] ,并明确规定氯霉素残留限量为不得检出 。 样、磺胺二甲嘧啶标样、盐酸克伦特罗标样,浙江 目前,国外采用商品化的氯霉素试剂盒,直接 省疾病预防控制中心;辣根过氧化物酶( ), HRP 竞争酶联免疫法检测氯霉素。该法灵敏度高、操作 华美生物工程公司;, 二甲基甲酰胺( ), NN-