加工型马铃薯品种Shepody农杆菌介导的转化体系研究.pdfVIP

中国虐学c邑提 2011,27(21)：87—92 ChineseAgriculturalScienceBulletin 加工型马铃薯品种Shepody农杆菌介导的转化体系研究 辛翠花 ，黄三文 ，郭江波。，刘 杰 ，冷小云 ，屈冬玉 (中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081；内蒙古科技大学数理与生物工程学院，内蒙古包头014010) 摘 要：马铃薯Shapody是经济价值很 高的炸条加工品种，但Sbepody对逆境胁迫非常敏感，为确立 Shepody的遗传转化体系并获得转基因马铃薯，以叶片、茎段和微型薯为外植体 ，分别比较 了不同转化 条件 (茵液浓度、侵染时间及激素配比)对遗传转化效率的影响。结果表明：叶片为最理想的外植体，以 0 。。=0．5的菌液侵染 10min，在加有1．0mg／L萘乙酸(NAA)和 1．0mg／L反式玉米素(zT-t)的MS20选择 培养基上的遗传转化率最高，其愈伤诱导率可达到95％，分化率可达到20％。通过该转化体系将抗晚疫 病基因R1导入马铃薯，获得 了具有卡那霉素抗性的转化植株，经PCR鉴定外源基因已经成功导入马铃 薯基因组中。 关键词：马铃薯；Shepody；遗传转化；外植体 中图分类号：$532 文献标志码 ：A 论文编号：2011-0513 ResearchofAgrobacterium-mediatedTransformationSystem forEconomicallyImportant PotatoCultivarShepody XinCuihua，HuangSanwen，GuoJiangbo，LiuJie，LengXiaoyun，QuDongyu (InstituteofVegetablesandFlowe~，ChineseAcademyofagriculturalSciences，Beijing100081； 2SchoolofMathematics，PhysicsandBiologicalEngineering， InnerMongoliaUniversityofScienceandTechnology，Baotou014010) Abstract：PotatoShepodyiseconomicallyimportantpotatocultivarforrfenchfriesintheworld．However，this cuhivarexhibitsverysusceptibleto severeenvironmentalstress．Theaim ofthisstudywastodevelop an efficientplanttransformationsystem forpotatocuhivarShepodyandtoobtaintransgenicpotatoes．LeaLfdisks． stem segmentsandminitubersfrom potatocuhivarShepodywereused asreceptormaterialstocompare transformation efficiencywith differentAgrobaeterium tumefaeienscontent，durationofinfection and the proportionofhomr ones．Theresultsshowedthatleafdiskswasmostsuitableofrtheinductionofcallusand shoots；Le￡LfdisksexplantsinfectedbyA．tumefaeiensstrainAgl一0( 0=O．5，10min)andselectedonMS20 containing1．0mg／LNAAand1．0mg／Lzeatin-trans(ZT-t)，yieldedthehighesttransformationefficiencywith 95％ofcall