反相高效液相色谱法测定白肋烟烟叶中的游离氨基酸.pdfVIP

维普资讯 第 19卷 第 1期 化 学 研 究 Vo1．19 No．1 2008年3月 CHEMICAL RESEARCH Mar．20o8 反相高效液相色谱法测定 白肋烟烟叶中的游离氨基酸 景延秋。，周苏玫。，王昌军，高玉珍。，宫长荣 (1．河南农业大学 农学院，河南 郑州 450002；2．中国烟草 白肋烟实验站，湖北 武汉 430030) 摘 要：建立了一种用于烟草中游离氨基酸测定的反相高效液相色谱法．实验采用超声波水解 、邻苯二甲醛／3 一 巯基丙酸作为衍生剂进行柱前衍生．色谱柱为依利特 c．柱 (4．6mmi．d．×250mm，5 m)，流动相 A为 18 mmol／L的醋酸钠溶液 (pH7．2)含体积分数为0．002％的三乙胺和0．3％的四氢呋喃，流动相 B组成为：100 mmol／L的醋酸钠溶液 (pH7．2)一乙腈一甲醇 (体积比为 1：2：2)，流速为 1．0mL／min，柱温为40℃．荧光检测 器，激发波长350am，发射波长450am．方法的回收率为95．3％～100．7％，RSD为2．32％ ～9．24％(n=6)． 该方法简便 、准确、重现性好．测定了不同肥料配比生产的白肋烟烟叶中17种游离氨基酸的含量．结果表明，不 论有机肥与无机肥怎样配比，天冬氨酸的含量与各氨基酸相比都是最高的；随着饼肥的加入，大部分氨基酸的含 量是先增加后逐渐降低的趋势，15％饼肥+85％无机肥与30％饼肥+70％无机肥配比时，大部分游离氨基酸 的含量接近，30％饼肥 +70％无机肥配比时的游离氨基酸总量最高，综合考虑，30％饼肥+70％无机肥配比 时的烟叶质量最好． 关键词：高效液相色谱；游离氨基酸；白肋烟叶；施肥方法；饼肥 ；无机肥 中图分类号：S572 文献标识码：A 文章编号：1008—1011(2008)O1—0068—05 Determination ofFreeAminoAcidsinBurleyTobaccobyHigh PerformanceLiquid Chromatography JINGYan—qiu’，ZHOUSu—mei。，WANGChang~un，GAOYu—zhen’，GONGChang—rong’ (1．CollegeofAgronomy，HenanAgriculturalUniversity,Zhengzhou450002，Henan，China； 2．BurleyTobaccoExperimentalStationofCNTC，Wuhan430030，Hubei，China) Abstract：A reversed—phaseHPLCmethodwasdevelopedfordeterminingfreeaminoacidsinburleyto— bacco．Thetestwasdonewithphthalaldehyde(OPA)／3-mercaptopropionicacid(3-MPA)asthepre— columnderivativereagent．ChromatographiccolumnwasElitteC18column(4．6mmi．d．×250mm，5 Ixm)．MobilephaseAwas18mmol／LNaAc(pH7．2)including0．002％(V／ triethylamineand 0．3％( I)／furanidine．MobilephaseBwas100mmol／LNaAc(pH7．2)-aeetonitrile-methanol( V =1：2：2、．Thecolumntemperaturewa