海参、海胆养殖水体中多抗性细菌抗性基因的初步研究.pdfVIP

维普资讯 海参、海胆养殖水体 中多抗性细菌抗性基因的初步研究 陈明娜 ，党宏月 (1．中国科学院 海洋研究所海洋地质与环境重点实验室，山东 青岛 266071；2．中国科学院 研究生院，北京 100049) 摘要 ：抗药性细菌对生态环境、养殖业以及人类健康构成严重威胁。以大连海参、海胆养殖场多抗性细菌筛 选为基础 ，采用分子生物学手段对 d0株抗性细菌进行 了氯霉素、土霉素及氟氯霉素抗性基 因检测 ，探讨抗药 t 性分子遗传机理 ，从而为控制抗药性细菌的产生和传播提供研 究基础 。 关键词：氯霉素抗性基 因(cat基 因)；土霉素抗性基 因( 基 因)；氟氯霉素抗性基 因(／o尺基 因)；多抗性 中图分类 号 ：Q93 文献标识码 ：A 文章编 号 ：1000—3096(2008)03—0013一O6 海参 、海胆一直被认为是两种非常重要的海珍 个土霉素抗性基因编码_l7]，其 中 tel(A)一(E)以及 let 品，具有很高 的营养价值和药用价值 。在过去几十 (G)是在革兰氏阴性细菌 中发现的主要土霉素抗性 年中，全球的海参、海胆被大量捕捞 ，以致 自然资源 基 因 ]，编码细胞膜相关蛋 白起 到从细胞 内排 出土 缺乏 。近年来 ，中国养殖业迅速 发展 ，海参 、海胆的 霉素 的作用 口 ，在海水养殖环境较为常见 ]。tet 养殖更成为中国沿海地 区重要的经济来源。然而养 (M)是一种在革兰氏阳性菌和阴性菌 中都普遍存在 殖业一些不规范运作造成病害 问题 日益严重 ，细菌 的土霉素抗性基 因，主要编码核糖体保护蛋白ElO]，tet 特别是弧菌往往是一些主要疾病的致病菌 ，例如海 (S)也是一种重要 的土霉素抗性基因，主要起保护核 参的烂边病 、烂 胃病 、化板症 、细菌性溃烂病·、腐皮综 糖体的作用口 ，研究发现 ，这两类 tet基 因在海水养 合症 口]，海胆 的黑嘴病 、红斑病等 都与一些病原 殖环境中也较为常见_l】。最近研究发现 ，带有氯霉 菌的感染有关。为 了抑制病害 的发生 ，各种抗生素 素抗性基因的多抗性细菌往往 同时携带土霉素抗性 被广泛用于养殖业 。抗生素的使用在抑制病害的同 基 因tet(B)或 tet(D) ]。这种细菌的多抗性现象 时也在不 同程度上诱发 了细菌抗药性 的产 生，致使 可能是由于多种抗生素共 同选择或者是抗生素之间 在养殖环境中大量抗药性细菌的存在。海水 中抗药 交叉选择的结果口 。尽管抗药性细菌已引起国内外 性细菌的存在和快速传播对 中国的海洋生态环境 、 的广泛关注，但是 目前 国内对海洋环境 中抗药性细 海水养殖业及人类健康造成了很大的威胁 。 菌的研究还非常有限。 在海水养殖 中，氯霉素被认为是一种有效 的病 该项研究 的 目的是通过分子生物学手段对海 原菌抑制药物 ，但 由于其很强的毒副作用 ，中国已于 参 、海胆养殖环境 中多抗性细菌 中部分抗性基 因进 1999年将该药列为禁用药物 。但最近研究发现 ，养 行分析 ，对多抗性细菌的抗性机制形成初步了解 ，从 殖环境中仍有大量氯霉素抗性细菌存在 ]，推测其 而为下一步对抗药性细菌 防治 的研 究提供研究基 原因可能与氟氯霉素 (一种氯霉素的派生物)或者其 础 。 他抗生素的使用有关 ]。研究发现许多细菌是通过 1 材料与方法 抗性基 因而实现其抗药性机理 的 ]。cat基 因主要 存在于革兰氏阴性细菌 中，包括 catI、catII、cat11I 1．1 氯霉素抗性细菌的培养及基 因组 DNA 和 catⅣ4种类型，它们通过编码氯霉素 乙酰转移酶 提取 而使氯霉素失活_l6。