巴比妥钠与牛血清白蛋白结合反应的热力学研究.pdfVIP

第28卷，第3期 光谱学与光谱分析 200 and March，2008 8年3月 SpectroscopySpectralAnalysis 巴比妥钠与牛血清白蛋白结合反应的热力学研究 林 娟1，赵 炜1，丁 飞1，蒋志强2 1．中国矿业大学化工学院，江苏徐州 281008 2．攀枝花学院生物与化学工程学院，四川攀枝花617000 摘要采用荧光光谱研究了药物巴比妥钠(BBTS)和牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机理，运用热力学方 法确定了巴比妥钠和牛血清白蛋白主要是以静电力相互作用，该过程是一个熵增加、Gibbs自由能降低的自 比在低温时小，得到巴比妥钠和牛血清白蛋白的结合比为1。1，证实了巴比妥钠和牛血清白蛋白之间的作 用是生成复合物的静态猝灭过程，并且采用同步荧光技术考察了巴比妥钠对牛血清白蛋白氨基酸残基微环 境的影响。 关键词巴比妥钠；牛血清白蛋白；荧光光谱；热力学参数 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2008)03—0648-04 mL移液器(德国， 引 言 3C型精密pH计(上海雷磁仪器厂)，1 蛋白质是生物体中最重要的生物大分子之一，它参与各 厂)。 种生命活动过程，是生物体赖以生存的基础，血清白蛋白是 血浆中含量最丰富的蛋白质。它是生物体中药物输送蛋白， 能和许多内源性或外源性物质广泛结合。药物经过机体的转 化，改变其药理和毒理活性。研究药物与生物分子之间的作 用机理，有助于了解药物的药理作用及毒副反应机理，从而 科学指导临床用药。 巴比妥钠(barbitalsodium，简称BBTs)是巴比妥类药物 oNa 中最重要的一种，被用作镇静剂、催眠剂，也用作麻醉诱导 scheme1 Structu忡ofImrbitmsodil]lll 剂和治疗癫痫病[1]。该药大剂量使用可致死，其与生物分子 mol 作用的结合机理及药理活性等目前未见报道。 牛血清白蛋白(生化试剂，Sign[1a公司)：6．7×10_6 本实验用荧光光谱在模拟人体生理条件下，研究了巴比 ·L-1；巴比妥钠(分析纯，沈阳瑞丰精细化学品有限公司)： tool· 妥钠(B瑚rs)与牛血清白蛋白(BSA)的作用机理，根据热力6．7×10-4mol·L-1；Tris-Hcl缓冲溶液(内含0．1 学参数确定了它们之间的作用力类型，计算了二者之间的结 L-1的NaCl以维持离子强度)：pH7．40；其他试剂均为分析 合常数和结合比，为阐明BBTS在人体内的储存方式、传输纯，实验用水为二次去离子水。 机制及药理作用等提供了重要信息。 1．2实验方法 巴比妥钠结构式见Scheme1。 的BBTS工作液，以pH 1实验部分 刻度后摇匀。放置10rain，然后置于1咖荧光比色皿中，固 定荧光激发波长290衄，入射和出射狭缝均为5．0咖，扫 1．1仪器与试剂 描荧光光谱并测量荧光强度。 收稿日期：2006—12-16。修订日期：2007-03-06 基金项目：中国矿业大学科学研究基金项目(200613013)资助