紫杉醇诱导不依赖于Caspase3细胞类似Paraptosis的荧光光谱分析.pdfVIP

第28卷，第11期 光谱学与光谱分析 2008年11月 and November，2008 SpectroscopySpectralAnalysis 陈同生1，王小平2，孙磊1，王会营1，王龙祥1 1．华南师范大学激光生命科学研究所，暨激光生命科学教育部重点实验室，广东广州510631 2．蹙南大学附属第一医院麻醉科，广东广州 510632 术检测了抑制细胞活性的特性，结果表明大于70ranol·L-1浓度的紫杉醇可以显著抑制细胞活性；采用激 光共聚焦扫描荧光成像从形态上检测了紫杉醇诱导细胞死亡的形态特征，表明紫杉醇诱导了类似副凋亡 (Paraptosis)特征的细胞肿胀和细胞质空泡化，而且没有细胞膜皱褶、细胞核浓缩等细胞凋亡的特征；通过 基因质粒转染在细胞转染稳定表达基于荧光共振能量转移(FRET)质粒SCAT3，并利用FRET受体光漂白 明在紫杉醇诱导细胞质肿胀和细胞死亡的过程中Caspase-3没有被活化。以上研究结果表明紫杉醇可以通过 类似Paraptosis的方式明显诱导细胞程序性死亡，该过程不依赖于Caspase-3的活性。 关键词紫杉醇(Tax01)l 微镜 中图分类号：Q631文献标识码：A DOI：10．3964／j．issm1000-0593(2008)11—2623-05 引言 性细胞死亡，如凋亡和自噬之同区别的详细比较[1]。 紫杉醇(Tax01)是一种高效、低毒、广谱、作用机制独特 对细胞死亡机理的深入研究表明细胞程序性死亡(PCD)的抗癌天然植物药物，它促进微管聚集、组织微管解聚，从 有多种形式，根据不同的标准有不同的分类[1]。其中大多数 而改变微管的动态特性C1钆11]。大量的研究表明紫杉醇可以 研究者将PCD分为凋亡(Apoptosis)，自噬(Autopha_gy)和副抑制多种肿瘤细胞的增殖并触发明显的细胞凋亡，但是其作 凋亡(Paraptosis)--种形式[1]。Paraptosis是一种完全不同于用机理并不清楚[12-15]。激光共聚焦荧光显微成像以及荧光共 凋亡的程序性细胞死亡方式[1卅。Paraptosis典型的形态学特振能量转移(F剥巳T)等荧光技术已经被广泛应用于在活细胞 征是内质网和线粒体肿胀[1剖。在生化机理方面，Paraptosis中进行信号调控转导机制的研究[16-19]。荧光光谱技术被广泛 应用于肿瘤特征，中药成分分析以及中药作用机理的研 与凋亡发生的机制、调控及信号转导明显不同。Speran- dio[2’3]等的研究发现，Paraptosis形式的程序性细胞死亡是 TINEI，阴性的。Caspase抑制剂和Bcl一甩超表达不能阻断 Paraptosis形式的细胞死亡，丝裂原活化的蛋白激酶性[1 (脚K，Mitogemactivatedproteinkinases)可介导Parapto- sis的发生[33；胰岛素样生长因子I受体[31和TNF受体家族 成员TAJ／TROYC4]可诱发类Paraptosis的发生；A】P1／趾ix系‘17·181。 是一种能和细胞中的钙结合死亡相关蛋白(Calcium-bindillg本文利用荧光成像和荧光光谱技术在活细胞中研究了紫 death-related protein)AIJGr·2相互作用的蛋白，它可抑制Pa-杉醇诱导细胞死亡的特征和机理，发现紫杉醇明显可以通过 raptosis的发生[3]。因此，当细胞发生非凋亡形式的程序性诱导细胞肿胀和细胞质空泡化从而导致细胞类似Paraptosis， 细胞死亡如Paraptosis时，应用传统调控凋亡的遗传学或药而且期间细胞膜完好，并且Caspases家族的光谱抑制剂不能 抑制紫杉醇诱导的细胞肿胀和细胞质空泡化以及细胞死亡。 理学方法对其进行调控是无效的[5]．迄今为止，关于Parap- 收稿日期：2007-05-08