Hugl-1基因在人大肠癌组织中的表达及其对LS174细胞增殖和迁移能力的影响.pdfVIP

垫 笙 旦第4卷第 期 ChinJClinicians(ElectronicEdition)．Septexnber15．2010．v0l1．4．No． · 论 著 · Hugl一1基 因在人大肠癌组织中的表达 及其对 LS174细胞增殖 和迁移能力的影响 黄士勇 郝立强 孟荣贵 王中川 【摘要】 目的 研究 nngl一1基因在人大肠癌组织中的表达及其与临床病理的相关性，探讨外 源Husl-1基因转染对大肠癌 LS174细胞增殖和迁移能力的影响。方法 采用 RTP·CR及 Western— blot法检测人大肠癌组织及相应癌旁正常组织中mRNA和蛋白质的表达水平。以成功构建的分别能 稳定表达外源pcDNA3．0一nugl一1、空载体peDNA3．0的大肠癌细胞系和未转染的LS174细胞为研究对 象，通过软琼脂集落形成、划痕修复、细胞黏附和Transwell细胞侵袭等一系列细胞学功能实验，观察 稳定转染细胞株Hugl-1的表达差异对肿瘤细胞增殖、黏附、运动和侵袭的影响。结果 nugl-1基因 在大肠癌组织中表达下调或缺失，表达水平低于癌旁正常组织。Hugl一1表达降低与肿瘤分期及淋巴 结转移相关。RT—PCR、Western—blot显示重组体 pcDNA3．0-Hugl一1转染细胞株中目的基因Sugl·1在 mRNA和蛋白质水平上表达均较空载体转染细胞株和未转染细胞株增强 (P0．05)；对转染前后的 细胞观察表明，重组体转染组细胞增殖能力无明显改变，但是其迁移运动和侵袭能力降低 ，细胞黏附 能力增加。结论 研究表明，nugl一1表达下调与大肠癌的发生发展有关，Hugl一1基因表达下调可能使 肿瘤细胞的结构稳定性丧失，促使肿瘤细胞扩散。 【关键词】 肠肿瘤； 基 因表达调控，肿瘤； 逆转录聚合酶链反应； 印迹法，蛋 白质； Hugl一1基 因 AnalysisofHugi-1geneexpressionandthebiologicaleffectsincolorectaicancer HUANGShi-y0 ， HAOLi-qiang，MENG舶 一gui，WANGZhong—chuan；DepartmentofAnorectalSurgery，XinhuaHospital 够 Z池 dtOShanghaiJiaotong UniversitySchoolofMedicine，Shanghai200092，China Correspondingauthor：HUANG Shi—y0， ，Email：smmu2005@163．con 【Abstract】 Objective TodeterminetheexpressionofHugl一1geneincolorectalcancerandthe biologicalbehaviors ofLS174 before and after transfection in vitro．Mehtods Reverse ~anscripfion— polymerasechainreaction(RT—PCR)andWesternblotsmethodswereusedtodetecttheexpressionlevelof mRNA nadproteinofnugl一1geneincolorectalcancertissuesandaccordingpara—cnacernormaltissues．RT— PCR and W estern—-blotshowed respectively thathte nngl··1 gene were expressed higher in celllines transfeetedbypcDNA3．0-Hugl一1thna incelllinesan-transfectedandtransfectedbyanemptyvectorbothon mRNA andproteinlever．Softagarcolonyformation，wound—healingexperiment，adhesionassayandMatrigel invasionassayswere usedinvitrotostudytheeffectsofnugl-1expressionontransfectedcellsprolifer