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32 2 ( ) Vol． 32 No． 2
第 卷第 期 中南民族大学学报 自然科学版
20 13 6 Journal of South-Central University for Nationalities (Nat． Sci． Edition) Jun． 20 13
年 月
重组人细胞色素P450 2C9 在毕赤酵母中的胞内表达
，
吴云华 孙鹏宇
( ， ， 430074)
中南民族大学生命科学学院 国家民委生物技术重点实验室 武汉
CYP2 C9 DNA ， P4502 C9 5
摘 要 以含有 基因完全编码框的克隆载体质粒 为模板 并在人细胞色素 的 端插入
kozak 3 6 × His PCＲ ， pPIC3． 5K ， Sal I
序列及 端 标签进行 扩增 克隆至真核表达载体 利用电激法将经 线性化的重组
pPIC3． 5K-2 C9 GS115 ， 、 PCＲ ，
质粒 转化至毕赤酵母 中 通过抗性 表型和 筛选多拷贝整合株 甲醇诱导毕赤酵母
GS115 / pPIC3． 5K-2 C9 ，SDSWestern blotting ． :
的表达 和 分析鉴定表达产物 结果表明 含有重组质粒的重组
pPIC3． 5K-2 C9 55KD ， ， CYP2 C9
表达了大小为 的目的蛋白 与预期大小相符 说明人细胞色素 可在毕赤酵母的胞
内表达．
P4502C9 ; ;
关键词 人细胞色素 毕赤酵母 胞内表达
中图分类号 TQ464 ． 7 ;Q78 文献标识码 A 文章编号 1672-4321 (2013)02-004 1-05
Intracellular Expression of Human Cytochrome P450 2C9 in Pichia pastoris
Wu Yunhua ，Sun Pengyu
(Key Laboratory for Biotechnology of National Commission for Nationalities ，College of Life Science ，
South-Central University for Nationalities ，Wuhan 430074 ，China)
Abstract Using cloning vector plasmid DNA containing CYP2 C9 complete
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