类磷脂修饰丙烯腈共聚物电纺膜的制备与酶固定化.pdfVIP

类磷脂修饰丙烯腈共聚物电纺膜的制备与酶固定化 黄小军，叶 鹏，徐志康* 浙江大学高分子科学研究所，杭州310027 关键词：丙烯腈共聚物 磷脂 电纺膜 酶固定化 脂肪酶 聚丙烯腈膜由于具有良好的物理和化学稳定性，易于控制的微孔结构以及制 备方便等特点，因此得到广泛的应用。但是聚丙烯腈较强的疏水性和较差的生物 相容性，容易导致蛋白质在膜表面的粘附和固定化酶的失活等(1) 。磷脂是天然生物 膜脂双层主要组成成份之一，对生物膜的结构完整性以及各项功能的发挥至关重 要，尤其是生物膜中作为主体的脂双层的化学组成和物理特性显著影响各种膜蛋 白的活性、热稳定性等。我们将磷脂修饰于丙烯腈共聚物膜表面，初步研究了其 血液相容性(2) 。结果表明，含有磷脂修饰的丙烯腈共聚物膜具有良好的血液相容性 和生物相容性。本文通过静电纺丝方法制备磷脂修饰的丙烯腈共聚物电纺膜作为 酶固定化的载体，希望利用磷脂独特的生物特性，为高分子材料表面固定化酶蛋 白提供友好仿生环境，以提高固定化酶生物活性和稳定性，同时利用电纺膜高孔 隙率、纤维直径可调节特点消除酶催化反应时的扩散控制。 通过水相沉淀共聚合的方法合成不同[2-(甲基丙烯酰氧)乙基]磷脂酰胆碱 (MPC)含量的丙烯腈共聚物，将其配成均一的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液，在输 出电压为+10 kV、喷头/接收板距离为 16 cm 以及1.0 ml/h 的流量下成功制备类 磷脂修饰丙烯腈共聚物电纺膜(如图1) ，并研究了脂肪酶在膜上的吸附能力和酶活 性保留率，初步考查了磷脂对固化酶性能的调控作用。 (a) PAN (b) PANCMPC3 (c) PANCMPC5 Figure 1. Electrospun membranes from 6 wt.% PAN and PANCMPC solution. 酶在共聚物电纺膜上进行吸附固定过程中，发现膜的载酶量随着时间的延长 而增大。在固定化初期，载酶量随时间迅速增加，在大约在90 分钟左右达到吸附 * 通讯联系人。 电话： 0571 电子邮件： xuzk@ipsm.zju.edu.cn 平衡(如图2) 。由于静电纺丝纤维膜具有纳米或者亚微米尺寸，有利于提高载酶量。 如图2 所示，共聚物电纺膜上的载酶量可以达到20 mg/g 以上。 我们还比较了聚丙烯腈和类磷脂修饰丙烯腈共聚物电纺膜上固定化酶活性保 留率。如图3 所示，对于聚丙烯腈电纺膜，酶活性保留率为51.6%，而对于类磷脂 修饰共聚物电纺膜，酶活性保留率分别为73.5%和78.6%。可见，类磷脂修饰丙烯 腈共聚物电纺膜上固定化酶的活性得到显著升高。这主要归功于类磷脂修饰共聚 物膜为固定化酶营造一种生物相容性的微环境，从而促进了固定化酶活性的提高。 30 ) PAN g / PANCMPC3 80 g m 25 PANCMPC5 ( ) n i % e ( t o 20 n 60 r o p i t f