一种改良的CTAB法提取马尾松基因组DNA’.pdfVIP

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广东林业科技2009年第25卷第2期 一种改良的CTAB法提取马尾松基因组DNA’ 陈碧华 (福建省林业科学研究院福州350012) 的要求,经凝胶电泳检测.DNA纯化效果好。 关键词 改良CTAB法马尾松针叶基因组DNA 中图分类号:Q527+.3文献标识码:A The DNAExtractionofPinusmassoniana Genomic Using an CTABMethod Improved ChenBihua of AcademyForestrySciences,FuzhouFujian,350012) (Fujian AbstractTheneedlesofPinus玎I(硌son施,☆口werecollectedtoextractthe DNAofP. massoniana genomic an CTABmethod.Itsconcentrationand satisfiedthe PCR e— of usingimproved purity request experiments.Thegel demonstratedthe effectofDNA lectrophoresis good purification. words CTAB DNA Key improvedmethod,Pinusmassoniana,needle,genomic massoniana 马尾松(Pinus Lamb)是我国南方地区低山丘陵荒山造林的先锋树种,具有生长快,适应性 广,造林更新容易,营林成本低,耐干旱、瘠薄等优良特性。其松脂产量高,木材纤维长,是造纸和人造纤维的 重要工业用材树种,在我国林业生产中占有十分重要的地位。 马尾松分子水平上的研究目前主要集中在分子标记和cDNA文库方面,对基因的研究较少。本研究主 要目的是开展马尾松桂酸辅酶A还原酶基因(cinnamyol-CoA 的提取是最基本的也是首要的一步,其成功与否关系到对今后马尾松CCR研究能否顺利进行,因此马尾松 基因组DNA提取方法对马尾松分子生物学特性的研究起着十分重要的作用。马尾松基因组DNA的提取方 法已见发表,但提取方法和效果不尽相同¨引,本文利用改良的CTAB法提取基因组DNA。 1实验材料与仪器 1.1试验材料 幼树枝条上部针叶。样品采集后挑取无病虫害嫩叶,立即置于一20℃的冰箱中保存备用。 1.2仪器及试剂 1.2.1抽提仪器陶瓷研钵,50,1.5mL离心管,量筒,烧杯,玻璃棒,镊子,1000,200,10,2.5uJL的Eppen— ·基金/项目:福建省科技厅青年人才项目(2007F3017)。 作者简介:陈碧华(1967一),男,福建龙海人,博士,高级工程师,从事林业生物技术研究。 万方数据 陈碧华:一种改良的CTAB法提取马尾松基因组DNA 5804 5415 pendoffcentrifugeR离心机(德国Eppendoff公司),EppendodcentrifugeD离心机,旋涡混合器,哈 纳酸度离子计pH211,高压蒸汽灭菌器KT-30L(日本)。 chi公司),电泳仪DYY-6C型和电

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