大鼠心肌组织中microRNA和18S rRNA的降解与死亡时间的相关性.pdfVIP

法 医 学 杂 志 2010年 12月 第 26卷 第 6期 ·4l3· 大鼠心肌组织中microRNA和 18SrRNA的降解与死亡时 问的相关性 李文灿 ，马开军 ，张 萍 ，王慧君 ，沈忆文 ，周月琴 ，赵子琴 ，马 端 ，陈 龙 (1．复旦大学 上海医学院法医学系，上海 200032；2．上海市公安局 物证鉴定 中心 上海市现场物证重点 实验室，上海 200043；3．复旦大学 生物医学研究院出生缺 陷研 究中心，上海 200032) 摘 要 ： 目的 探讨大鼠死后心肌组织 中microRNA和 18SrRNA的含量变化与死亡时间的关系。 方法 将 SD大鼠断颈处死后置于 25qC室温、50％湿度 的环境 中．于死后不 同时间提取心肌组织 中总RNA。利用实 时荧光定量 PCR检测大鼠心肌组织 中miR一1-2和 18SrRNA 的含量变化 ．结果用循环 阈值 (Ct值)表示 ，分 析死亡时间与 Ct值 的关系．最终建立死亡时间推断的回归分析方程 结果 大鼠死后 120h内心肌组织中 miR一1—2含量无 明显变化 ，此后开始下降；而 l8SrRNA含量在 96h内逐渐增多，随后开始缓慢下降。大鼠 死后不 同时间 18SrRNA的 Ct值 以及 18SrRNA和 miR一1—2的ACt值与 PMI呈非线性相关 ．二次 曲线拟 合的 值 分别为 0．9487、0．8072 结论 l8SrRNA 的 Ct值和 18SrRNA与 miR—l一2的 ACt值 与 PMI之 间存在 明显非线性关系．可以作为早期死亡 时间推断的指标 关键词 ：法 医病理学 ；微 RNAs；RNA，核糖体 ，18S；死亡时间；聚合酶链反应 ；大鼠 中图分类号 ：DF795．1 文献标志码 ：A doi：10．39691i．issn．1004—5619．2010．06．003 文章编号 ：1004—5619(2010)06—0413—05 Estimation ofPostmortem IntervalUsing microRNA and 18S rRNA Degradation in RatCardiacMuscle LIWen—canJ，MAKai-jun2,ZHANGPing，WANGHui-jun~SHEN Yi—wenl,ZHOUYue—qin1,ZHA0Zi— qinl，MADuan3,CHENLong (J．DepartmentofForensicMedicine，ShanghaiMedicalCollege，FudanUniversity,Shanghai 200032，Chi— nag2．ShnaghaiKeyLaboratoryof CrimeScienceEvidence，Instituteof ForensicScience，ShanghaiPublic SecurityBureau,Shanghai 200043，China；3．Instituteof BiomedicalScience，FudanUniversity,Shanghai 200032，China) Abstract：ObjectiveToexploretherelationshipbetweenthetime—dependentlevelchangesofmicroRNA and 18SrRNA andthedifferentpostmortem interval(PMI)inratcardiacmuscle．MethodsSD ratswere sacrificed by cervicaldislocation and placedatambienttemperature25℃ with ahumidity of50％．Total RNA wasextracted from the ratcardiacmuscleatdifferenttime points afterdeath．ThelevelsofmiR—l一2 and 18S rRNA were examined using real—time PCR in ratcardiac muscle．The resultswere expressed by