荧光光度法测定维生素B.pdfVIP

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2017-09-11 发布于重庆
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Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software For evaluation only. 荧光光度法测定维生素B 荧光光度法测定维生素B11 广东医学院医学检验学院 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software For evaluation only. 一、实验目的：学习荧光定量分析法的基本原理熟悉荧光分光光度计的使用方法 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software For evaluation only. 二、实验原理：维生素B1 （又名硫胺素）在碱性高铁氰化钾溶液中氧化成硫色素，可用正丁醇提取，硫色素在紫外线照射下发出蓝色荧光，在一定浓度范围内，荧光强弱与维生素B1含量成正比，这是其荧光定量测定的依据。 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software For evaluation only. 三、仪器与试剂三、仪器与试剂 1. RF-1501荧光分光光度计 2. 1.5ug/ml维生素B1标准液(0.1N HCl配置) 3. 碱性铁氰化钾溶液（避光保存） 4. 酸性水：取2.5ml冰醋酸，用水稀释至 500ml Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software For evaluation only. 5.样品溶液的制备：取1片复合维生素片，将其碾压成粉后，用少量3%醋酸溶液溶解15mg，定容至50 ml，过滤后，移液管量取清液0.4 ml于刻度试管中，用缓冲液稀释至10ml ，摇匀备用。 Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software For evaluation only. 四、实验步骤四、实验步骤 1.按下表配制反应液： 1.按下表配制反应液： Generated by Foxit PDF Creator © Foxit Software For evaluation only. 标准标准样品样品溶液空白溶液空白 1 1 — — 对照溶液（mL) — —