雏鸡体内新城疫病毒强毒的荧光定量RT-PCR检测.pdfVIP

中国兽医科学 2009，39(02)：159—163 ChineseVeterinaryScience 中图分类号：S852．659．5 文献标志码 ：A 文章编号：1673—4696(2009)02—0159—05 雏鸡体 内新城疫病毒强毒的荧光定量 RT-PCR检测 殷俊 磊 ，伍祥龙 ，伍 明山。，文 明 ，周碧君 ，温贵兰 (1．贵州大学 动物科学学院，贵州 贵阳 550025；2．贵州省草种场 ，贵州 独山 558200； 3．安顺市畜牧局 ，贵州 安顺 561000) 摘要：将新城疫病毒(NDV)强毒 H2株经滴鼻感染和 同居感染 18日龄雏鸡 ，应用建立的荧光定量 RT— PCR检测病毒在雏鸡体 内各组织的动态分布。结果显示，滴鼻感染后第 6h，即可在肺、脑、脾、肾和肠 5种 组织 中检 出NDVRNA，而 12h后所有组织均能检测到；同居感染 12h后才可在肺 、脑、脾和肾4种组织中 检 出，而 24h后所有组织均能检测到 ；在上述 2种感染途径 中，受检组织 内的病毒含量从高到低依次为：肺 、 脑 、脾 、肾、肠、肝 、心脏和腿肌 。与普通 RT—PCR相比，检测灵敏度相近。 关键词 ：荧光定量 RT—PCR；新城疫病毒 ；分布 ；雏鸡 Detection ofvirulentNewcastlediseasevirusin chicks byreal—-timeRT-PCR YINJun—lei，WU Xiang—long ，WU Ming—shan。，wENMing ，ZHOU Bi—jun ，WENGui—lan (1．CollegeofAnimalScience，GuizhouUniversity，Guiyang550025，China；2．GrassSeedFarm of GuizhouProvince，Dushan558200，China；3．AnshunBureauforAnimalHusbandry，Anshun561000，China) Abstract：A real-timeRT—PCR assaywasestablishedto detectNewcastlediseasevirus(NDV)in 18一 day—oldchicksinfectedwithvirulentNDV H2strain andchicksindirect—contactwiththeinfectedchicks． Byreal—timePCR detection，thelung，brain，spleen，kidney and intestinefrom theexperimentally infected chickswerepositiveforNDV RNA athour6post—infection(PI)，andal1tissuespecimenswerepositiveat hour12PI．Thelung，brain，spleen，andkidneyfrom thechicksinfected bydirect—contactwerepositiveat hour12PIandallspecimensfrom thesechickswerepositiveforviralRNA athour24PI．Theorderoftis— sueswithNDV RNA loadfrom hightolow wasthelung，brain，spleen，kidney，intestine，liver，heartandleg muscle．Thereal—timeRT—PCR hadsim ilarsensitivitywiththeconventionalRT—PCR insensitivity． Keywords：real—timeRT—PCR；Newcastlediseasevirus；distribution；chick 新城疫 (Newcastledisease，ND)是 由新城疫病 检测 ，也能定量检测 ，且所需时间较短 、敏感性较高， 毒 (Newcastlediseasevirus，NDV)引起 的一种禽类 故很快得到 了广泛应用，如病原快速诊断 、mRNA 急性、高度接触性传染病 ，对世界养禽业 的危害极