水产品中多聚磷酸盐含量的离子色谱测定方法 编制说明.docVIP

编制说明 一、任务来源及意义 本标准是根据本标准由全国标准化技术委员会下达的《水产品中多聚磷酸盐含量的测定--离子色谱法》制标任务，计划编号为“2011709 ”，由山东出入境检验检疫局负责主持起草。 多聚磷酸盐作为保水剂和品质改良剂广泛用于鱼类等水产品和肉制品加工过程中，起到保持水分改善口感的作用，同时，可以提高产品的出成率。输往美国等国家鳕鱼等水产品中广泛应用多聚磷酸盐作为品质改良剂，但是，欧盟等国对其进口的鱼片、扇贝柱和人工蟹肉等严格限制使用多聚磷酸盐，一般限量为5g/kg；另外，还有一些水产品中禁止使用多聚磷酸盐，如扇贝柱加工过程中严禁使用。近几年来，我国鳕鱼片及其他水产品加工企业发展迅速，为提高产品的出成率，加工过程中使用多聚磷酸盐的现象亦较为普遍，国内外客户经常提出检验鳕鱼等水产品中有无加入多聚磷酸盐或检验多聚磷酸盐含量的要求。目前，国内外还没有检验水产品中多聚磷酸盐的有效方法。 二、编制原则与依据 标准的编制依据于GB/T 1.1—2000《标准化工作导则 第一单元 标准的起草与表述：标准的结构和编写的规则》、GB/T 20001.4-2001《标准编写规则 第4部分：化学分析方法》和GB/T1.2-2002《标准化工作导则第2部分：标准中规范性技术要素内容的确定方法》的要求进行编写制定的。 三、国内外相关标准分析对比 目前，常规磷或磷酸盐的检验方法[1,2]，如国家标准等其他检验方法一般是先将多聚磷酸盐水解成正磷酸盐，采用磷钼酸喹啉法测定样品中总的含磷量，不能区分测定的是哪一种多聚磷酸盐，由于鳕鱼和扇贝柱及其他水产品中水溶性磷酸盐的存在，要判别在鳕鱼和扇贝柱加工过程中是否加入了多聚磷酸盐是很困难的。离子色谱法是测定无机阴离子的有效手段之一，有人用离子色谱法测定化工品的多聚磷酸盐的组成[3-5]，我们曾对离子色谱法测定鳕鱼及扇贝柱中多聚磷酸盐的方法进行了研究[6]，采用去离子水超声波萃取鳕鱼及扇贝柱中多聚磷酸盐，沉降去除蛋白质和脂肪，离子色谱电导检测器检测磷酸根、焦磷酸根、三聚磷酸根、三偏磷酸根。 四、检验方法 1. 样品处理 将切片机切好的100g样品用绞肉机绞碎，立即称取5g样品（精确至 0.001g）于50mL塑料具盖离心管中，均质5min，加入40mL的煮沸超纯水，超声波水浴中提取8 min，过滤， 滤液用2mol/LNaOH溶液调pH8，用超纯水定容到50mL，样液测定前用0.22μm滤膜过滤。 磷酸钠、焦磷酸钠、三聚磷酸钠、三偏磷酸钠易溶于水，因而鱼肉、扇贝柱等水产品中的磷酸根、焦磷酸根、三聚磷酸根，三偏磷酸钠，可用去离子水萃取到水中，超声波萃取加快萃取速度，实验表明超声波萃取5分钟即可达到萃取平衡（见图1）。鱼肉、扇贝柱等水产品中的蛋白质及少量脂肪可能会污染分析柱，因此本方法原先采用三氯醋酸沉降蛋白质和脂肪，通过过滤去除。采用AS11-HC或AS11分析柱4.6mm，进样前先过0.22μm的滤膜，可不必用三氯醋酸沉降蛋白质和脂肪。水产品中存在的酶极易导致某些磷酸盐的分解，如在水产品只加入焦磷酸盐，用常温的水萃取后上机测定很难测定到焦磷酸根，为防止酶对某些磷酸盐的分解，样品用绞肉机绞碎后，立即称取样品于塑料具盖离心管中，均质，加入煮沸超纯水使酶灭活。多聚磷酸盐在水中不稳定，六偏磷酸盐在水中没有固定的形式，高温和酸性条件加速多聚磷酸盐解聚，可用NaOH将溶液调至碱性pH＞8；通常情况下，样品溶液在两个小时内进行分析，不要长时间放置；经实验表明在0.1%的三氯醋酸溶液中三聚磷酸钠在10小时内未有明显的解聚变化。 扇贝柱、虾等其他水产品样品的处理方式与鳕鱼样品的处理方式相同。 2.色谱条件选择 本实验中采用AS11-HC分析柱，采用AS11分析柱亦可以达到分离鳕鱼和扇贝柱等其他水产品中多聚磷酸盐的目的，只是多聚磷酸盐的出峰时间短些。 图1超声波萃取曲线 图2为离子色谱检测鳕鱼的多聚磷酸盐的色谱图，图中所示三聚磷酸根等多聚磷酸根离子可很好的分离，三氯醋酸在该实验条件下在多聚磷酸盐后面出峰，不影响多聚磷酸盐的测定。 8-磷酸钠、11-焦磷酸钠、12-三聚磷酸钠、13-三偏磷酸钠 图2. 鳕鱼样品中多聚磷酸盐的色谱图 3．焦磷酸根和六偏磷酸根 鱼肉和扇贝柱样品加标回收实验表明焦磷酸钠在样品中不稳定，尽管测定方法可以检出焦磷酸根，但随着测定次数的增加焦磷酸根信号峰降低很快，鱼肉中单独使用焦磷酸根很难准确测定。可明显观察到正磷酸根的信号增加。实验中可能是鱼肉中的某种酶促使焦磷酸根分解，具体原因还不清楚。但鱼肉中使用过三聚磷酸盐或三聚磷酸盐和焦磷酸盐混合物的可测得焦磷酸根。六偏磷酸根在水中不是以单一形式存在，可能会以多种磷酸根的形式存在，并且不同批次的六偏磷酸根溶于水中，各种