NY_T 1295-2007 荞麦及其制品中总黄酮含量的测定.docVIP

中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1295－2007 荞麦及其制品中总黄酮含量的测定 Determination of Flavones in Buckwheat and Its Products 2007-04-17 发布 2007-07-01 实施  前 言 本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。 本标准起草单位：农业部作物品种资源监督检验测试中心、山西省农业科学院农产品综合利用研究 本标准主要起草人：李为喜、刘方、王述民、朱志华、边俊生、李红梅、刘三才。 荞麦及其制品中总黄酮含量的测定 1 范围 本标准规定了荞麦及其制品中总黄酮含量的分光光度测定法。本标准适用于荞麦及荞麦制品中总黄酮含量的测定，其最低检出限为0.5mg。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括堪误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB／T 5497 粮食、油料检验水分测定法 GB／T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 荞麦制品 buckwheat products 由苦荞或甜荞或与其他谷物混合制成的非发酵制品或初级加工品，如养麦米、荞麦面粉，苦荞茶、荞麦面条等。 4 原理 黄酮类化合物中的酚羟基与三氯化铝在中性介质中生成具有特征吸收峰的有色络合物，在一定的浓度范围内，该络合物的吸光度值与总黄酮的浓度成正比，符合郎伯一比尔定律。 5 试剂 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。水，GB／T 6682，三级。 5.1 三氯化铝溶液[c(A1C13)=0.1 mol／L]： 称取12.1 g三氯化铝(ALCl3·6H2O)置于烧杯中，加水溶解后移人500 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。 5.2 乙酸钾溶液[c(CH3COOK)=1 mol／L]： 称取49.1 g乙酸钾(CH3COOK)翻：烧杯中，加水溶解后移人500 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。 5.3 甲醇水溶液：7+3。 5.4 芦丁标准溶液[ρ(C27H30016)=0.0500 mg／mL]： 称取芦丁标准品(C27H30016·3H20，纯度95％)0.0573 g，置于烧杯中，加甲醇溶液(5.4)溶解后，移人1000 mL容量瓶中，用甲醇溶液(5.4)稀释至刻度，即得0.0500 mg／mL的芦丁(C27H30016)标准溶液。 6 仪器 6.1 可见分光光度计。 6.2 恒温水浴振荡器：振荡频率范围40 r／min--220 r／min。6.3 分析天平：精度值为0.1 mg。 6.4 离心机：最高转速大于4000 r／min。 6.5 旋风磨。 6.6 砻谷机。 7分析步骤 7.1 试样制备 去除荞麦中杂质，将荞麦样品放入水中浸泡5 min，然后置于砻谷机中，反复脱壳5次～6次，收集碎米和米粒置于旋风磨中粉碎，粉末全部通过直径0.5 mm筛(40目)；荞麦制品则直接置于旋风磨中粉碎。 7.2 试料溶液的制备 称取试样0.2 g～l g，精确至0.000 l g(苦荞试祥的称样量约为0.2 g；甜荞试样称样量约为1 g；荞麦制品视其总黄酮含量在0.2 g～1.0 g之间称取试样)，置于150 mL具塞三角瓶中，加入甲醇溶液(5.3)30 mL，盖紧瓶塞，将三角瓶置于(65±2)℃的恒温水浴振荡器中在(160±10)r／min的振荡频率下振摇2h，趁热过滤，滤液置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶液(5.3)清洗滤纸和残渣，合并滤液，冷却至室温，加甲醇溶液(5.3)至刻度，摇匀，为试料待测液。 7.3 标准曲线的绘制 用移液管分别吸取芦丁标准溶液0.25 mL、0.50 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL置于10 mL容量瓶中，加入三氯化铝溶液(5.1)2mL、乙酸钾溶液(5.2)3 mL，用甲醇溶液(5.3)定容至刻度，摇匀，室温下放置30 min。同时作空白。标准曲线中芦丁含量分别为0.00125 mg／mL、0.00250 mg／mL、0.00500 mg／mL、0.0100 rng／mL、0.0150 mg／mL、0.0200 mg／mL。 在波长420nm处测定吸光度。以吸光度值为横坐标，浓度值为纵坐标，绘制标准曲线。 7.4 试液的测定 准确吸取1.0 mL试料待测液置