ITS鉴定木材种类：一例司法鉴定研究实例.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2013 年，第32卷，第6期，第782-786 页 GenomicsandAppliedBiology,2013,Vol.32,No.6,782-786 研究报告 ResearchReport ITS 鉴定木材种类：一例司法鉴定研究实例 1 1,2 1 1,2* 黄欣 周倩 雷湘华 高必达 1湖南农业大学植物保护学院,长沙,410128;2湖南农业大学司法鉴定中心,长沙,410128 *通讯作者,bdgao@ 摘 要 本研究选取一例非法收购国家重点保护植物油丹的司法鉴定案作为研究实例，在确认鉴定技术可 行的前提下，应用ITS 序列分析对待检测的原木进行了分子鉴定。本研究采用CTAB 法提取原木DNA，对 其提纯后进行ITSrDNA 的PCR 扩增，再对PCR 阳性产物进行克隆、测序，将测序结果进行Blast 分析和构 建系统发育树。结果表明，送检的47 根原木中有9根被鉴定为油丹。本研究采用ITS序列系统发育分析方 法，成功鉴定了原木种类，为今后类似司法鉴定案件的审理提供了可靠的鉴定意见。 关键词 油丹,ITS序列,分子鉴定, 司法鉴定 IdentificationofPlantsbyITSSequencing:AJudicialCaseStudy 1 1,2 2 1,2* HuangXin ZhouQian LeiXianghua GaoBida 1 College ofPlant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128; 2 Judicial Center ofHunan Agricultural University, Changsha, 410128 *Correspondingauthor,bdgao@ DOI:10.3969/gab.032.000782 Abstract ThisarticleselectedonejudicialidentificationcaseofillegalacquisitionofAlseodaphnehainanensis asanexample,whichisaplantthatintensivelyprotectedinChina.Inthepremiseoffeasibleidentifyingtechnique, weconductedamolecularidentificationontheobjectlogsusingITSsequenceanalysis.TheDNAoftheobject logsareextractedundertheCTABmethodandpurified,thenaPCRexpansionoftheITSrDNAisconducted.Af- terwardsthePCRpositiveproductisclonedandsequenced,ontheresultsofwhichaBlastanalysisisdoneand phylogenetictreeisconstruced.Theresultsshowedthat9ofthe47submittedlogsareAlseodaphnehainanensis.In thisstudy,thespeciesofthelogsaresuccessfullyidentifiedusingthephylogeneticanalysisofITSsequencefrag- mentwhichprovidesareliableexpertopinionforsimilarforensicidentificationcasesinthefuture. Keywords Alseodaphnehainanensis,ITSsequence,Molecularidentification,Judicialidentification 木材鉴定技术对于打击非法采伐、保护珍稀濒 花等(2004)利用中国不同地区杜仲rDNA 的ITS 序 危种材、合理保护森林资源具有重要意义(姜笑梅等, 列进行了分析测序；蔡金娜等(2000)对中国不同地区 2010)。为了更好地发挥木材鉴定技术在实际生产生 的蛇床进行了rDNA 的ITS 序列分析；赵卫国等 活中的作用，近年来木材鉴定技术不断发展，特别是 (2004)对桑属植物ITS序列进行系统发育分析；薛华 随着分子遗传学的发展，分子标记及D