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畜牧兽医学报2013，44(12)：1926—1931
Acta
VeterinariaetZootechnicaSinica
doi：10．11843／j．issn．0366—6964．2013．12．010
绒山羊II台J
L成纤维细胞的制备
何晓琳1，袁超1，屈 雷2，陈玉林卜
(1．西北农林科技大学动物科技学院，杨凌712100；2．榆林学院生命科学研究中心，榆林719000)
摘要：本研究旨在建立可稳定表达FGF5s的绒山羊胎儿成纤维细胞系。采用RT—PCR方法，从陕北白绒山羊
皮肤组织cDNA中克隆FGF5s基因，构建PB转座子介导的真核表达载体PB—EGFPFGF5s；在脂质体的介导下，
将PB—EGFP—FGFSs载体和转座酶载体共转染绒山羊胎儿成纤维细胞，通过嘌呤霉素进行稳定筛选。并利用PCR
因并构建了PB-EGFP—FGF5s真核表达载体；PCR结果显示，FGF5s已整合到细胞基因组中；RTPCR结果表明，
该基因在转录水平上表达。另外，转染试验表明PB转座子可在绒山羊胎儿成纤维细胞中发生高效转座。本研究
为制备绒山羊转基因细胞系提供了一种高效的方法，并为下一步通过核移植方法获得转基因绒山羊奠定了基础。
关键词：陕北白绒山羊；FGF5s；PiggyBac转座子；稳定转染
中图分类号：$827；s814．8文献标志码：A 文章编号：0366-6964(2013)121926—06
ofFGF5sfrom
Cloning Gene CashmereGoatandItsStableTransfection
of FetalFibroblastsBasedon
Caprine PiggyBacTransposon
HE
Xiao-linl，YUANLei2，CHENYu—lin“
Cha01，QU
AnimalScienceand AF 712100，China；
(1．Collegeof Technology，NorthwestUniversity，Yangling
ScienceResearch
Center，Yulin 719000，China)
2．Life University，Yulin
ofthe istoestablishtheCashmerefetalfibroblastscell
Abstract：The
objectivepresentstudy goat
linethat CashmereFGF5 RT—PCR FGF5s
stablyexpresses goat s．Byusing technology，thegene
ofCashmerewasfirstclonedfromtotalRNASwhichextractedfromCashmere
skin，
goat goat
intothe vectorPB——CMV——Puro—_EGFPbasedon
andtheninserted eukaryoticexpression PiggyBac
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