基于反转录实时荧光定量PCR的3种标准曲线定量活副溶血性弧菌的差值分析.pdfVIP

Research Paper 研究报告 微生物学报 A cta M icrobiolog ica Sinica 54 (4 ) :383 － 390 ; 4 April 20 14 ISSN 000 1 － 6209 ; CN 11 － 1995 / Q http :/ / journals． im ． ac ． cn / actamicrocn doi : 10. 13343 / j ． cnki． wsxb ． 20 14 . 04 . 004 基 于反转录实时荧光定 量 PCR 的 3 种标 准曲线 定 量活 副溶血 性弧菌的差值分析 * ， ， ， ， ， 靳梦曈 孙文烁 李沁 孙 晓红 潘迎捷 赵 勇 ， ( ) ， 上 海海 洋 大学食 品学 院 农业部 水产 品贮 藏 保 鲜 质 量 安 全 风 险 评 估 实 验 室 上 海 上 海 水 产 品加 工 及 贮 藏 工 程 技 术 研 究 中 ， 20 1306 心 上 海 : 【 】 PCR (Real-time Reverse-Transcriptase PCR ，Real-time RT - 摘要 目的 比较 分 析 基 于 反转 录 实时 荧光 定 量 PCR) 3 。 【 】 技术 建立 的 种 标准 曲线定量样 品 中活副溶血 性 弧 菌 数 量 的差 异性 方 法 体 外 转 录 合成 带 有 目的 (tlh ) RNA ， (10 8 CFU / mL ) RNA ， 片段 基因 的 标准 品 提 取 纯培养 副 溶血 性 弧 菌 样 品 提 取接 种 于 虾 上 副 溶血 (106 CFU / g) RNA ， 3 RNA cDNA ，10 ， Real-time PCR 性 弧菌 样 品 将 种 样 品分别 反转录 得 到 倍 梯度 稀 释 进行 ， A 、B 、C ( A C ) 。 A 、B 、C 6 扩增 建立标准 曲线 其 中标 准 曲线 和 为本研究 首次建立 用 标 准 曲线 分 别 定量 个 样 品 (2 个 纯培养 副溶血性 弧 菌 样 品、2 个 人工 污 染 煮 熟 南 美 白对 虾 样 品 和 2 个 人 工 污 染 生 南 美 白对 虾 样 ) ， ， 。 【 】3 品 中活副溶血性 弧菌 数量 并与传 统涂 布计 数法进行 比较 分 析 定量 结 果 的差 异性 结 果