缺血启动未成熟新生大鼠室管膜下区和脑白质内在修复潜能的体外研究.pdfVIP

堡塞旦 !堕 苤查垫 生 旦箜 鲞箜 期 ChinJApplClinPediatr，June2013，Vo1．28，No．12 ·891· ·／J,JL~经基础 与临床 · 缺血启动未成熟新生大鼠室管膜下区和脑 白质 内在修复潜能的体外研究 毛凤霞，李文娟，陈惠金，钱龙华 摘【要】 目的 体外探讨缺血启动新生大鼠未成熟室管膜下区(SVZ)和脑白质内源性修复机制。方法 体外培养5日龄内sD新生大 鼠的SVZ和脑室周围白质细胞 ，各分为正常对照组和氧气．葡萄糖剥夺 (OGD) 组 ，利用免疫荧光双标技术检测新生祖细胞 的增殖分化情况 ，利用 Hoechsd3342／碘化丙啶双染技术和流式细 胞术检测新生细胞成活情况 。结果 OGD组SVZ和脑白质在 OGD后24h、48h、72h、7d及 14d均出现明显 的凋亡和坏死细胞，各时段新生细胞的凋亡率均显著高于同时段对照组 (P均0．01)。荧光显微镜观察显示， 与正常对照组比较 ，OGD组 SVZ和脑白质新生 NG2 祖细胞和 o4少突胶质细胞(OL)前体的细胞数量在 OGD后72h内均明显增加 (P均0．05，0．01)，CNPase未成熟 OL和MBP成熟OL在OGD后7d和 14d则 较同时段正常对照组明显减少(P均 0．05，0．01)。结论 缺血可诱导 SVZ和脑白质神经祖细胞激活和明显 增殖 ，并沿OL系分化，但最终仅有极少量新生OL前体能分化为未成熟和成熟OL；同时，缺血导致OGD组新生 细胞出现明显凋亡和坏死。 【关键词】 脑室周围白质软化；缺氧乏糖；室管膜下区；白质；大鼠 Study ofsubependymaivent~cularzoneandwhitematterasanendogenoussourceofceHsforwhitematterre- pairinneonatalratswithperiventricularleukomalaciainvitro MAOFeng—xia．LIWenuan，CHENHui-jin．QIAN 一 hua．DepartmentofPediatrics，XinhuaHospitalAffiliatedtoShanghaijiaotongUniversitySchoolofMedicine， r— natalResearchinShanghaiInstituteforPediatricResearch，Shanghai200092，China Correspondingauthor：CHENHut-jin，Emaif：hjchenk@163。corn 【Abstract】 0bjecfive Toexploreanendogenousserf-repairpotentialityforinjuredcerebralwhitematterfrom bothofsubependymalventricularzoneandwhitemattercellculturesinneonatalratswithoxygenglucosedeprivation (OGD)invitro．Methods Thewhitematterandsubependymalventrieularzonetissuesrfomtheneonatalratswithin5 daysoldwereseparatelyusedtoprepareprimaryglia—derivedcellcultures，andthesecellcultureswererandomlydivi— dedintothecontrolgroupand theOGD group．Thedouble—labelfluorescentimmunoanalysiswasusedtoobservethe proliferationanddifferentiation oftheglia—derived cellscamefrom both ofsubependymalventricularzoneandwhite matteractivatedbyOGD．TheHoechst33342／propidium iodide(PI)stainingandtheflow cytometrytechnologywere usedtoassesstheapoptoticratesofthenew