原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
* * 灰毛寄生叶中槲皮苷和广寄生苷的提取、分离及鉴定 一、实验目的 1.掌握聚酰胺柱层析分离黄酮类化合物的原理和方法。 2.巩固薄层层析的操作技术。 3.熟悉黄酮类化合物的光谱分析。 二、基本原理 聚酰胺是通过酰胺基聚合而成的一类高分子化合物，分子中含有丰富的酰胺基，可与黄酮类化合物形成氢键结合而被吸附。化合物分子中的酚羟基数目越多，则吸附力越强，芳香核、共轭双键多的吸附力也大。易形成分子内氢键的化合物，会使化合物的吸附力减少。本实验利用不同结构的黄酮类化合物与聚酰胺形成氢键的能力不同，采用聚酰胺柱层析法进行分离。 三、操作要点 1.预试：按“中药化学成分鉴别实验中黄酮类的鉴别”项下的方法进行。 Mg+HCl反应 A1C13反应 FeCl3反应 若结果为明显阳性，继续以下实验。 2.提取 （1）总黄酮的提取：称取灰毛寄生叶40 g粉碎，置500 ml圆底烧瓶中，加入95％乙醇100 ml，70℃水浴温浸1小时，倾出上清液，残渣加95％乙醇80 ml重复提取2次，每次1小时，合并3次提取液，充分静置后过滤，滤除沉淀物，滤液用旋转蒸发仪浓缩得浸膏。醇浸膏用60℃的饱和食盐水溶解，每次约8 ml～10 ml，共5～6次，至盐水溶解液几乎无色，合并食盐水溶液，用乙酸乙酯60 ml萃取约4次，最后一次萃取液应对Mg+HCl反应显色不明显，合并乙酸乙酯提取液，回收溶剂，得总黄酮提取物。黄酮提取物用热乙醇约2 ml溶解后与0.3 g聚酰胺（80目～100目）拌合，挥尽乙醇作为柱层析分离用样品。 (2)总黄酮的分离——聚酰胺柱层析 装柱：取1.8 cm×28 cm玻璃层析柱一根，称取6 g（80目～100目）聚酰胺，加水60 ml浸泡半小时，用水为溶剂湿法装柱。 上样：制备的样品加入约5 ml水浸泡后上于柱顶。 洗脱：先用约2倍量柱体积水洗脱，除去糖类成分，再使用30％、50％乙醇依次洗脱，洗脱液每份收集10～20 ml，柱上出现两主色带，第一色带（30％乙醇洗脱）几乎被洗脱完全后，换用50％乙醇洗脱至第二色带洗脱完全，停止洗脱。收集的组分经薄层层析检查，合并相同组分，减压回收各单一组分溶剂，甲醇重结晶，分别得结晶I和Ⅱ。 四、鉴定 1.化学反应 α-萘酚反应检测糖类化合物 Mg+HC1反应 A1C13反应 检测黄酮类化合物 2.层析鉴定 样品：A标准品：槲皮苷，广寄生苷，儿茶素，槲皮素 B结晶I，C结晶Ⅱ，D总黄酮乙醇液 a．硅胶薄层层析 展开剂：氯仿-丙酮-甲酸（5:3:1） 显色剂：1％三氯化铁-1％铁氰化钾（临用时等体积混合）
文档评论（0）