反复冻融固相萃取液相色谱串联质谱法测定蓝藻中5种微囊藻毒素.pdfVIP

第4l卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第12期 2013年12月 ChineseJournalof 1844～1850 AnalyticalChemistry 反复冻融一固相萃取．液相色谱串联质谱法测定 蓝藻中5种微囊藻毒素 王超¨ 彭涛2 吕怡兵1 滕恩江1 2(扬州市环境监测中心站，扬州225007) (中国环境监测总站，北京100012) 摘要建立了反复冻融．固相萃取．液相色谱串联质谱法测定蓝藻中5种微囊藻毒素(MCs)的方法。水中 cc／37 mL 蓝藻经0．45仙m混合纤维滤膜过滤分离，采用3次-20oC冻融，2次575％甲醇提取，末端封尾的 mL mm×2．1 c。。固萃小柱浓缩和10 5％甲醇净化，选择C。。色谱柱(50 mm，1．7Izm)，以0．1％甲酸和0．1％甲 酸一乙腈为流动相，梯度洗脱分离，采用多反应监测模式，外标法定量分析。5种MCs在1．25～50恤∥L内线 性良好，相关系数大于0．995，仪器精密度(RSD)为3．0％一11．5％，方法检出限为0．05—0．2 ng。在1、5和 50 5个月的胞内和胞外MCs监测。 关键词微囊藻毒素；液相色谱质谱；蓝藻；冻融；固相萃取 1 引 言 随着淡水水体的富营养化13益严重，频繁发生的蓝藻水华对饮用水安全构成严重危险。微囊藻毒 念珠藻属(Nostoc)等经次生代谢产生的单环七肽化合物¨j，其典型的分子结构见图1。已鉴定出的 大可耐受摄人量为0．04)Lg／(kg·d)E73；中国规定饮用水中MC—LR的标准限值为1．0¨∥L¨1。 表1 5种微囊藻毒素(MCs)的结构信息和分子量 Table1 Structuralinformationandmolecularof5 weishtmicrocystins(MCs) MCs主要存在于蓝藻细胞内，当细胞死亡破裂时，胞内MCs才被大量释放到水体中，造成水质污 MCs的前处理过程繁琐，包括蓝藻的收集、细胞破碎和浸提、MCs的浓缩和净化等步骤；而且蓝藻提取液 基体复杂，MCs含量极低，如未得到充分净化，将抑制MCs的质谱离子化效率，影响色谱柱的寿命，增加 仪器维护成本。目前国内关于胞内MCs检测的研究报道较少。蔡金傍等¨驯采用反复冻融-固相萃取一 2013-04-24收稿；2013-08-09接受 本文系水体污染控制与治理科技重大专项(No．2013Z资助项目 $E-mail：preparing@126．corn 万方数据 第12期 王超等：反复冻融．固相萃取一液相色谱串联质谱法测定蓝藻中5种微囊藻毒素 D．Glu Mdha COOH CH30 图1典型MCs的分子结构(以MC—LR为例，其中X和Z分别为亮氨酸和精氨酸) Molecularstructureof is whichXandZrefertoLeucineand MCs(MC-LRshown，in Fig．1 general Arginine) (最低检出量为0．1斗g)，且仅通过保留时间定性，易受复杂基体的干扰¨1’12J。吴伟文等¨3。采用固相微 萃取．HPLC法测定了水中2种微囊藻毒素。郭坚等¨41采用全自动固相萃取