子宫内膜异位症患者基质金属蛋白酶-2的表达及其临床意义.DOCVIP

临床医学论文-子宫内膜异位症患者基质金属蛋白酶-2的表达及其临床意义 【摘要】? 　　目的 探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在子宫内膜异位症(EM)发生发展中的作用及其临床意义。方法 SP法检测EM36例异位内膜组、EM32例在位内膜组和22例正常子宫内膜组中MMP-2的表达。结果 MMP-2在正常内膜组、在位内膜组和异位内膜组中阳性率分别为36.36%、65.63%和86.11%，异位内膜组MMP-2阳性率高于在位内膜组和正常内膜组（P0.05或P0.01）。在位内膜组中，分泌期MMP-2表达强于增生期（P0.05）；正常内膜组和异位内膜组中，分泌期与增生期MMP-2表达差异无显著性（P均0.05）。结论 MMP-2的表达异常与EM的发病有关。 【关键词】? 子宫内膜异位症 明胶酶A 免疫组织化学 　　子宫内膜异位症(Endometriosis， EM) 是生育期妇女的常见病，特点是子宫内膜在子宫腔被覆面以外的地方种植生长，包括内膜间质和上皮细胞在子宫腔以外部位的异位生长［1］，其发病机制尚不明了。本研究检测EM患者异位及在位子宫内膜组织、正常子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达，以探讨MMP-2在EM发生发展中的作用及其临床意义。 　　1? 资料和方法 　　1.1? 一般资料? 　　选择2005年12月～2007年5月期间在广西田阳县人民医院及右江民族医学院附属医院就诊，经开腹手术后病理检查证实为EM的患者。其中异位内膜组织36例（异位内膜组），年龄(36.3±4.5)岁，增生期22例，分泌期14例。同时通过刮宫或切开手术取EM患者的在位子宫内膜组织共32例（在位内膜组），年龄(35.8±6.2)岁，增生期16例，分泌期16例。选择同期因子宫肌瘤行子宫切除术的22例正常子宫内膜组织作为对照（正常内膜组），年龄(36.1±5.8)岁，增生期12例，分泌期10例。所有病例均无内分泌和感染性疾病，术前3个月无激素治疗史，手术均在增生期或分泌早期进行。三组年龄比较差异无显著性(P＞0.05)。 　　1.2? 实验试剂? 　　兔抗人MMP-2单克隆抗体、SP免疫试剂盒和山羊血清、DAB显色试剂盒均购自深圳晶美生物工程有限公司。 　　1.3? 标本制备 ?　　所有组织术后立即取材，经4%多聚甲醛溶液固定，石蜡包埋，5μm连续切片5张，1张行常规HE染色进行病理形态学观察，其余用于免疫组织化学染色。 　　1.4? 免疫组织化学检测? 　　切片常规二甲苯脱蜡，梯度乙醇至水。采用St reptavidin Peroxdase Conjugated Method 免疫组化方法，即SP法进行免疫组织化学染色，实验操作严格按说明书进行。以0.01M PBS代替一抗作为阴性对照，以已知阳性标本为阳性对照。 　　1.5? 结果判定? 　　MMP-2阳性信号为腺上皮细胞胞浆呈棕黄色着色，间质中也有表达。按参考文献［2］半定量的方法评定每一张标本：随机选取高倍镜(×400)下至少5个视野，计数阳性细胞的百分率，并按以下方法进行计分: 阳性细胞百分数为0%～4%者记为0分，5%～24%者记为1分，25%～49%者记为2分，50%～74%者记为3分，75%～100%者记为4分。阳性细胞免疫染色强度按如下方法计分: 无色为0分、浅黄色为1分、棕黄色为2分、棕褐色为3分；阳性细胞百分率评分和染色强度评分相乘产生每个病例的加权分数，即免疫组化染色评分=阳性细胞百分率评分×染色强度评分。0分为阴性(-)，1～2分为弱阳性(+)，3～4分为中等阳性(++)，4分以上为强阳性(+++)。 　　1.6? 统计学方法? 　　应用SPSS11.0软件进行统计学处理，计数资料采用χ2检验。 　　2? 结果 　　2.1? 三组内膜中MMP-2的表达情况? 　　免疫组织化学检测结果显示，在正常内膜组、在位内膜组和异位内膜组中均可检测到MMP-2的表达。三组阳性率比较：异位内膜组高于在位内膜组和正常内膜组（P0.05或0.01）；在位内膜组高于正常内膜组（P0.05），见表1。表1? 三组内膜中MMP-2的阳性率比较（略） 　　2.2? MMP-2的表达与月经周期的关系? 　　正常内膜组中，分泌期与增生期MMP-2表达较低，两者差异无显著性(P0.05)；在位内膜组中，分泌期MMP-2表达强于增生期（P0.05）；异位内膜组中，分泌期与增生期MMP-2表达较强，两者差异无显著性(P0.05)，见表2。表2? MMP-2的表达与月经周期的关系（略） 　　3? 讨论 　　EM病因和发病机制至今尚不完全清楚，目前内膜种植学说为大多数研究者推崇的理论，即脱落的内膜细胞经血逆流入腹腔并种植，完成粘附—侵袭—血管形成过程。 　　MMP是一锌离子依赖的中型蛋白酶家族，可以