碱性成纤维细胞生长因子促进兔缺血后肢 血管新生的实验研究.DOCVIP

临床医学论文-碱性成纤维细胞生长因子促进兔缺血后肢 血管新生的实验研究 ?【摘要】目的：了解局部应用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对促进兔缺血后肢血管新生的作用。方法：25只日本大耳白兔随机分2组，外科结扎切断各兔股动脉及其分支，制作兔后肢缺血模型。试验组各兔在缺血后肢肌肉内多次注射重组人bFGF蛋白（n=15）；对照组给予等剂量生理盐水（n=10）。术后4周，各兔行腹主动脉造影观察侧支血管形成情况，取内收肌和腓肠肌肌肉行病理切片HE染色应用图像分析系统统计血管密度，并用免疫组织化学方法检测内收肌和腓肠肌中VEGF阳性表达的血管数。结果：试验组兔侧支循环血管条数、血管密度及VEGF阳性表达的血管数均大于对照组（P＜0.01），缺血状态得到改善。结论：在兔缺血后肢肌肉中注射bFGF蛋白可促进血管新生，增加兔缺血后肢血液灌注，改善肢体缺血状态。 ??? 【关键词】缺血?成纤维细胞生长因子?新生血管化，生理性?兔 ????? Basic fibroblast growth factor(bFGF) improves the angiogenesis of the ischemic limbs in rabbits ?????? 【ABSTRACT】Objective:To evaluate the effect of local application bFGF on angiogenesis in ischemic limbs of rabbits.Methods:After ischemia models were induced by surgical ligation and cutting off left femoral artery in each rabbit,rabbits were randomized?to received intramuscular injection of recombinant human bFGF(n=15)or normal saline(n=10)in ischemic zone.Four weeks later, angiogenesis of ischemia models were observed and evaluated by abdominal aortography,histopathologic analysis and immunohistochemical studies with the antibodies of VEGF.Results:The number of capillaries,the compensatory circulation blood vessel and the vascular endothelial cells that expressed VEGF protein in bFGF group is more than those of saline group(P＜0.01).Conclusion:Intramuscular injection of recombinant human bFGF can improve the angiogenesis of the ischemic limbs is rabbits. ??? 【KEY WORDS】Ischemia?Fibroblast growth factor?neovascularization physiologic?Rabbtis?? 　? 研究表明，缺血心肌内注射碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor ,bFGF）可改善心肌功能，减少梗死面积，增加缺血区小动脉毛细血管数量等作用［1，2］。本实验通过兔缺血后肢肌肉内注射bFGF蛋白 ，观察兔缺血组织血管新生情况及缺血组织血液灌注改善情况。 ??? 1? 材料和方法 ??? 1.1? 材料? 成年健康日本大耳白兔25只（由河南省动物实验中心提供），体重2.5～3.0kg，平均2.8kg，雌雄不限。完全随机分组：对照组（缺血后肢肌注生理盐水）（n=10），实验组（缺血后肢肌注bFGF）（n=15）。重组人bFGF蛋白（rhbFGF）（购自北京双鹭药业有限公司），76%复广泛影葡胺（购自上海旭东海普药业有限公司），兔抗兔VEGF多克隆抗体（购自武汉博士德生物技术有限公司），SP9000二步法免疫组织化学检测剂盒、DAB显色试剂盒（购自北京中山生物技术有限公司）。 ??? 1.2? 兔下肢缺血模型? 各兔肌注氯胺酮（50mg/kg）获得麻醉效果后，无菌条件下经左侧腹股沟韧带中点（摸到股动脉搏动后）做一纵形皮肤切口2cm，暴露股动脉后， 自股动脉起始部分分离股动脉，在股