相思树种根瘤菌研究.pdf

摘要 从广西不同立地条件下的7种相思树木林分中采集根瘤并分离纯化获得53个相思树 种根瘤菌菌株，对其进行了较为全面、系统的研究。研究表明它们在平板上培养的菌落均 具有典型的根瘤菌形态特征。在试管内和盆栽苗木上进行回接和互接种，所有菌株均能有 效诱导结瘤。取接种后的苗木根瘤测定表明，它们都具有固氮酶活性。在利用柠檬酸盐、 3。酮基乳糖、牛肉膏蛋白胨、淀粉水解、水解明胶、氮源和碳源等方面，它们均具有典型 的根瘤菌生理生化特征。在BTB反应中有的菌株产酸，有的产碱。 相思树种根瘤菌具有广泛的生长适应性。在供试的53个菌株中，有许多菌株在9～39 条件下仍生长良好。有2个菌株对供试抗菌素均无抗性，4个菌株对所有供试抗菌素都具 有抗性，其余菌株对抗菌素的抗性存在着明显程度上的差别。 分离、纯化的53株相思树种根瘤菌株，经代时测定和在平板上菌落形成天数测定， h以 首次从相思根瘤菌中分出快生菌和慢生菌两种类型。其中有9个慢生菌株(代时6．2 上)，生长代时在10h以上的有4株。这些慢生根瘤菌与许多快生相思根瘤菌株那样具有 良好的耐酸碱、温度和盐碱逆境的能力。 用分离纯化获得的53个相思树种根瘤菌株接种试管苗，用33个菌株接种盆栽苗，结 果表明，接种后的试管苗平均结瘤率为53．5％、平均结瘤数2．4个、平均单株瘤重量为6．4 nInol mg、平均单个根瘤重量2．7mg、平均固氮酶活性2126c2114．手1瘤重．h一。不接种 根瘤菌的试管苗均无结瘤。接种后的盆栽苗木与对照相比，平均结瘤率提高6．2％、单株 片含氮量增加20．8％、单株总固氮量增加51．4％。 用5株不同的相思根瘤菌菌株接种到厚荚相思苗木后的造林结果显示， zG04菌株 的综合效应最好，其树高生长量增长15．5％、地径生长量增长7．5％、叶绿素含量增加 10．3％，这三项指标均居各菌株之首。 rDNA全序列进行测定和分析，相 首次通过分子生物学方法对豆科树种根瘤菌的16s 思树种根瘤菌株HJ06的16s 尺^疋D扫fm rDNA序列的同源性都在98％。因此， g朋D印和R^fzD6f“mzP占“m细珊d删m16s 菌株HJ06在分类上应属融fzD6mm属。 首次从豆科树种根瘤菌中用PCR方法扩增出n泓基因片段，确定了相思树种根瘤菌 99％：与脚P扫s括盯口n砂幻c口基因的NifFprotein，NifLprotein，NifAprotein和NifBprotein 的同源性为99％。 关键词：相思树种，根瘤菌，生物学特性，16s rDNA，，l弘基因 Abstract hl血is nodules wereselectedf如m7kinds invarioussite study，mot ofAc日c缸spp．forests conditions and53strainsrhizobiawereisolatedand menrather purified，and research．ThehaVe rhizobia featllreson cumvation． systematic colonytypical colony plate When or intesttubesand nodulescould inoculatingcross—inoculating seedlin