小麦条锈菌白化菌系遗传转化.pdfVIP

小麦条锈菌白化菌系的遗传转化 卢丽丽张如佳王阳’王美南井金学康振生 (西北农林科技大学植保学院，陕西省农业分子生物学重点实验室，杨凌712100) 摘要：应用基因枪转化技术，以小麦条锈菌野生白化菌系为转化受体，以含有潮霉素抗性基因(hpt)的质粒为插入 载体，对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行研究，建立了基因枪法转化小麦条锈菌的瞬时表达参数。用含有 潮霉素抗性基因的质粒轰击白化菌系夏孢子，经繁殖后其后代用特异PCR检测到目的片段，表明构建的遗传转化体系 可获得稳定的小麦条锈菌突变菌系。 关键词：小麦条锈菌；基因枪；转化体系 TheGeneticTransformationoftheAlbinoStrainsof Puccinia stri咖rmisf．sp．tritici Li—liZHANGRu-JiaWANG Mei—NanJINGJin·Xue LU Yang宰WANG KANG Zhen—Sheng PlantProtectionandShaanxi Laboratory (Collegeof Key ofMolecularBiologyfor AF 712100,P．R．China) University,Yangling Abstract：Transformationwasmade biolisticswiththewildvirulentalbinos仃ainsofP as system using striiformis transformationandthe with resistanceto asvectors．Asetof acceptors plasmidsgeneconferring hygromycinB(印0 was thetransient of weredetectedPCR establishedfor transformation parameters urediospores．Expectedfragments by fromthe oftransformed meallS山atthe callbeusedto stable amplificationprogenies urediospores．It developedsystem get mutantstrainsofP striiformis． words：Puccinia Key striiformis；biolistics；transformationsystem stritici)引起的气传病害，遍及世界各 小麦条锈病是由小麦条锈菌(PucciniastriiformisWest．f．sp 主要麦区，也是我国小麦上最重要的病害和主要监控研究对象。小麦条锈菌毒性变异频繁，可以通过 变异产生新的毒性小种，导致小麦品种抗病基因失效，引起小麦条锈病周期性流行为害。 病原菌毒性变异的机制有有性重组、突变、异核作用和适应性变异等多种途径，其中突变尤为重 要【1q】。小麦条锈菌是高度专性寄生菌，迄今未发现有性时期，不能在人工培养基上生长，因此，其 毒性突变研究的难度和工作量大。到目前为止，已研究了x射线、紫外线和化学诱变剂EMS对小麦条 锈菌的突变效应16~1…。但条锈菌不能进行有性杂交，通过以上方法获得的突变体难以找到明确的分子 遗