蛋白质组学技术鉴定吉兰-巴雷综合症患者与正常人血清的差异表达蛋白.pdfVIP

中文摘要 蛋白质组学技术鉴定吉兰一巴雷综合征患者与正常人 血清的差异表达蛋白 摘 要 目的：吉兰．巴雷综合征(GBS)是可能与感染有关和免 疫机制参与的急性多发性神经病。临床表现为急性进行性， 对称性四肢的迟缓性瘫痪，伴有或者不伴有感觉异常和自主 神经功能紊乱。其主要病理改变为周围神经炎症性节段性脱 髓鞘或轴索变性。由于该病可致呼吸肌麻痹，故病死率较高 ，国内外学者对此病均高度重视。一般认为本病属自身免疫 疾病，病人血液中存在与发病有关的抗体、补体、细胞因子 等，如能清楚地知道与吉兰．巴雷综合征发病相关的抗体、补 体及细胞因子究竟是何种蛋白质或多肽，则对明确其发病机 理乃至攻克此疾病有重要的意义。 新近出现的蛋白质组学技术是生命科学进入后基因组 类、数量、以及时间、空间上的变化来研究表达于细胞、组 角度综合分析生命活动的一门科学。蛋白质组学可以比较两 个或更多的样品之间蛋白质水平，是揭示疾病分子机制，发 现疾病标志蛋白，寻找新的药物靶标的理想工具。 由于毛细血管与人体绝大多数组织细胞直接进行物质 与能量交换，故大多数组织细胞病理变化可在血清蛋白质变 化中反应出来。血清蛋白质组学是指研究选定的目标人群血 清中表达的全部蛋白质，在建立正常蛋白质表达图谱的基础 中文摘要 上，寻找其差异蛋白质点，鉴定疾病相关蛋白质，进而研究其 结构和功能，为研究疾病病理生理机制、寻找早期诊断的特 异性标志物、药物作用靶点等开辟新的途径。 本研究利用蛋白质组学技术对吉兰．巴雷综合征患者的 血清进行研究，旨在发现吉兰．巴雷综合征相关蛋白质，以深 入理解吉兰．巴雷综合征分子机制，并为寻找早期诊断、治疗 吉兰．巴雷综合征的有效方法提供实验依据。 方法：取吉兰．巴雷综合征患者和正常人血清为样本(各 为30例)，提取血清蛋白，进行双向凝胶电泳：以固相pH梯 度等电聚焦为第一向，垂直十二烷基硫酸钠．聚丙烯酰胺凝胶 2DElite 以考马斯亮兰R250染色，图像分析软件ImageMaster 分析电泳图谱，得到匹配的蛋白质点；然后酶解胶内感兴趣 的蛋白质，所得肽段用基质辅助激光解析／电离．飞行时间 索蛋白质数据库，得出差异表达蛋白；肽段样品用 片段质量指纹图谱肽质量指纹图谱与第2级质谱得到的肽序 列信息一起用来检索蛋白质数据库，鉴定匹配上的蛋白质。 结果：24种蛋白质的表达量在吉兰．巴雷综合征患者与 正常对照组显著不同，其中17种蛋白质在吉兰．巴雷综合征 患者血清中表达量上调，这些蛋白质被鉴定为补体C3，a．2． 巨球蛋白，补体因子B，血浆铜蓝蛋白，补体因子H，补体 C4．B，维生素D结合蛋白，血清淀粉样P物质，丛生蛋白， Q．1．抗糜蛋白酶，触珠蛋白，Afamin，血红素蛋白，视黄醇 结合蛋白4，补体Cls亚成分，补体C4．A，Q．2锌糖蛋白； 中文摘要 7种蛋白质在吉兰．巴雷综合征患者血清中表达量下调，这些 蛋白质被鉴定为Q．1．抗胰蛋白酶，Ig K Y．1．C链恒定区，Ig ．C链恒定区链，CD5类抗原，载脂蛋白E，血清铁传递蛋白， 维生素D结合蛋白。 结论：我们发现并鉴定了一批GBS的相关蛋白，这些差 异表达蛋白对深入理解吉兰．巴雷综合征的发病机制并有望 在早期诊断、治疗上发挥作用。其中a．1．抗胰蛋白酶，触珠 蛋白，血浆铜蓝蛋白，血清淀粉样P物质，Q．2巨球蛋白，血 红素蛋白，a．1．抗糜蛋白酶和丛生蛋白等都是急性期蛋白的 成员，被认为是明显的炎症，组织损伤或者恶性肿瘤等病理 现象的标志物。他们的升高可能是GBS急性炎症反应的体 现。补体系统的多个成分的升高则进一步说明了GBS发病中 免疫机制的参与。而载脂蛋白E的降低，可能提示GBS患者 雪旺细胞免疫损害后的修复和再生因Apo．E下调而发生障 碍，导致周围神经脱髓鞘的结果。维生素D结合蛋白是一种