肝癌发展过程中促血管生成因子NogoB的转录调节机制.pdf

指导小组成员 余龙复旦大学遗传所教授 赵寿元复旦大学遗传所教授 吴超群复旦大学遗传所教授 中文摘要………………………………………………………………………………………。2 ABSTRACT……………………………………………………………………………………………………………………．．4 第一章………………………………………………………………………………………………7 肝癌中促血管生成因子NogoB的转录调控机制…………………………………………………．7 前 言……………………………………………………………………………………………………………………～8 材料和方法……………………………………………………………………………．．1l 一、材料………………………………………………………………………………．．1l 二、主要的仪器设备…………………………………………………………………．．17 三、生物信息学途径和计算机分析软件包…………………………………………．．18 四、实验方法…………………………………………………………………………．．19 结 果…………………………………………………………………………………………………………………。28 一、肝癌中H匝一laSt々JNogoB的转录调节……………………………………………。28 1．肝癌中缺氧通过HIF-lot诱导NogoB表达量增加……………………………．28 2．HIF-lct提高NogoB启动子的转录活性………………………………………32 3．NogoB启动子HIF-la作用位点的鉴定………………………………………34 4．HIF-la直接结合NogoB启动子上的缺氧应答元件…………………………37 二、肝癌中AP-1对NogoB的转录调节………………………………………………40 1．AP-l在肝癌中与NogoB的表达存在一致性………………………………。40 2．AP-1促进细胞I为NogoB的上调表达………………………………………～4l 3．AP-1提高NogoB启动子的转录活性………………………………………。42 5．AoFos抑制AP·l和TPA诱导的NogoB转录活性……………………………．44 6．NogoB启动子AP-1作用位点的鉴定………………………………………。46 7．AP-l能结合NogoB启动子上的TPA应答元件……………………………。49 讨 论…………………………………………………………………………………………………………………．．50 参考文献……………………………………………………………………………………．54 第二章……………………………………………………………………………………………．56 新14．3．3 epsilon剪切本的功能鉴定……………………………………………………………．．56 ——二聚化不是14-3．3 epsilon抑制紫外诱导的细胞凋亡所必需的…………………………．56 前言……………………………………………………………………………………………………………………．57 复旦大学博士学位论文 目录 材料和方法……………………………………………………………………………。59 一、材料………………………………………………………………………………．59 二、主要的仪器设备…………………………………………………………………一62 三、生物信息学途径和计算机分析软件包…………………………………………．．63 四、实验方法…………………………………………………………………………．．63 结果……………………………………………………………………………………………………………………．70 一、人类14．3．3 epsilon新剪切本的克隆和鉴定……………………………………。70 二、14-3-3 SV与14-3